產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：ⅫB組磷脂酶A2(PLA2G12B)重組蛋白人

英文名稱：Recombinant Phospholipase A2, Group XIIB (PLA2G12B)

PLA2G13; FKSG71; GXIIB; Phospholipase A2,Group XIII; Group XIIB secretory phospholipase A2-like protein

型號(hào)：GOY-01D23

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測(cè)分子量：-

實(shí)際分子量：-(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Prostatic Acid Phosphatase (PAP)  產(chǎn)品名稱：前列腺酸性磷酸酶(PAP)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Prostatic Acid Phosphatase (PAP)  產(chǎn)品名稱：前列腺酸性磷酸酶(PAP)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Neutrophil Elastase (NE)  產(chǎn)品名稱：中性粒細(xì)胞彈性(NE)重組蛋白物種：Canis familiaris; Canine (Dog，犬)

英文名稱：Recombinant Neutrophil Elastase (NE)  產(chǎn)品名稱：中性粒細(xì)胞彈性(NE)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Neutrophil Elastase (NE)  產(chǎn)品名稱：中性粒細(xì)胞彈性(NE)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Neutrophil Elastase (NE)  產(chǎn)品名稱：中性粒細(xì)胞彈性(NE)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

磷酸化有絲分裂激酶A抗體 Phospho-Aurora A (Thr288)

磷酸化β抑制蛋白1抗體 Phospho-beta-Arrestin 1 (Ser412)

磷酸化APS抗體 phospho-APS(Ser598)

有絲分裂激酶A抗體 Aurora A

干擾素誘導(dǎo)蛋白AIM2抗體 AIM2

水通道蛋白-2抗體 Aquaporine 2

腫瘤抑制基因ABI2/蛋白激酶結(jié)合蛋白抗體 ABI2

ADP核糖基化因子樣11抗體 ARL11

ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX1抗體 ARMCX1

ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX2抗體 ARMCX2

ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX3抗體 ARMCX3

自噬相關(guān)蛋白10抗體 Apg10

ⅫB組磷脂酶A2(PLA2G12B)重組蛋白人HGC-27人胃細(xì)胞HCC1937(人腺細(xì)胞)

土曲霉 Aspergillus terreus瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus

苜蓿中華根瘤菌鏈霉菌 Streptomyces sp.

大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞培養(yǎng)基嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞爪哇根霉 Rhizopus javanicus

蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

Sp2-0/小鼠骨髓瘤細(xì)胞株

中國(guó)臺(tái)灣根霉 Rhizopus formosensis青春雙歧桿菌 Bifidobacterium adolescentis

雙孢蘑菇 Agaricus bisporus鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum假單胞菌 Pseudomonas sp.

TE671 subline No.2(人橫紋肌肉瘤細(xì)胞)無花果曲霉 Aspergillus ficuum

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae煙色紅曲 Monascus fuliginosus

人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL