蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：二氫二醇脫氫酶2(DDH2)重組蛋白人

英文名稱：Recombinant Dihydrodiol Dehydrogenase 2 (DDH2)

AKR1C2; DD; BABP; DD2; HAKRD; MCDR2; Aldo-Keto Reductase Family 1,Member C2; Bile Acid Binding Protein; 3-Alpha Hydroxysteroid Dehydrogenase Type III

型號：GOY-01D25

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預測分子量：-

實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：-

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Galactosidase Beta (GLb)  產(chǎn)品名稱：半乳糖苷酶β(GLb)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Galactosidase Beta (GLb)  產(chǎn)品名稱：半乳糖苷酶β(GLb)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Galactosidase Beta (GLb)  產(chǎn)品名稱：半乳糖苷酶β(GLb)重組蛋白物種：Rhesus monkey (Simian，恒河猴)

英文名稱：Recombinant Ribonuclease H (RNASEH)  產(chǎn)品名稱：核糖核酸酶H(RNASEH)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Alanine Aminotransferase (ALT)  產(chǎn)品名稱：谷丙轉氨酶(ALT)重組蛋白物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

英文名稱：Recombinant Alanine Aminotransferase (ALT)  產(chǎn)品名稱：谷丙轉氨酶(ALT)重組蛋白物種：Cavia (Guinea pig ，豚鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

磷酸化活化轉錄因子4抗體 phospho-ATF4 (Ser245)

磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體 phospho-Amyloid Precursor Protein (Ser198)

磷酸化雄激素受體抗體 phospho-Androgen Receptor (Ser213)

磷酸化雄激素受體抗體 phospho-Androgen Receptor (Ser650)

磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3抗體 phospho-AKT1+2+3 (Tyr315+316+312)

磷酸化蛋白激酶B抗體 phospho-AKT1(Thr34)

磷酸化活化復制因子2抗體 phospho-ATF2(Ser472)

凋亡相關蛋白3抗體 42097

自噬相關蛋白4A抗體 ATG4A

載脂蛋白A4抗體 APOA4

自噬相關蛋白18抗體 ATG18

12脂氧合酶抗體 ALOX12

二氫二醇脫氫酶2(DDH2)重組蛋白人刺孢吸水鏈霉菌 Streptomyces hygrospinosus糖化酵母 Saccharomyces diastaticus

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae異常漢遜酵母 Hansenula anomala

MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14)費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

苜蓿中華根瘤菌Tissue Protein Extraction Reagent/組織蛋白抽提試劑

丹參酮IIA 細胞名稱

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae屎腸球菌 Enterococcus faecium

Romas(人淋巴瘤細胞)中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus橢圓釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae var.ellipsoideus

人結腸粘膜上皮細胞培養(yǎng)基光帽鱗傘 Pholiota nameko

Ampicillin(100mg/ml,1000X)大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

6-10B, 人鼻咽細胞系HCC94(人子宮鱗細胞（高分化）)

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae香菇 Lentinula edodes