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產(chǎn)品型號(hào)
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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-02 13:13:00瀏覽次數(shù):145次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D28 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Ribonuclease A10 (RNASE10) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
英文名稱:Recombinant Pyruvate kinase isozymes R/L (PKLR) 產(chǎn)品名稱:丙酮酸激酶同工酶R/L(PKLR)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
英文名稱:Recombinant Pyruvate kinase isozymes R/L (PKLR) 產(chǎn)品名稱:丙酮酸激酶同工酶R/L(PKLR)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
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英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 23B (MMP23B) 產(chǎn)品名稱:基質(zhì)金屬23B(MMP23B)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 23B (MMP23B) 產(chǎn)品名稱:基質(zhì)金屬23B(MMP23B)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
核糖核酸酶A10(RNASE10)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D28 |
產(chǎn)品名稱:核糖核酸酶A10(RNASE10)重組蛋白人
英文名稱:Recombinant Ribonuclease A10 (RNASE10)
RNASE9; Inactive ribonuclease-like protein 10
型號(hào):GOY-01D28
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測(cè)分子量:22.7kDa
實(shí)際分子量:27kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)
片段與標(biāo)簽:Leu27~Gln216 (Accession # Q5GAN6) with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點(diǎn):-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體 Alpha B Crystallin
α1微球蛋白抗體 Alpha 1 microglobulin
腺苷A2b受體/神經(jīng)生長(zhǎng)因子1受體抗體 ADORA2B
AMPK的相關(guān)蛋白激酶5抗體 ARK5
致瘤磷蛋白32相關(guān)蛋白1抗體 ANP32C
腺苷脫氨酶抗體 Adenosine deaminase
含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族4抗體 ASB4
ATRNL1蛋白抗體 ATRNL1
鐵蛋白Fe65樣蛋白1抗體 APBB2
鐵蛋白Fe65樣蛋白2抗體 APBB3
AFP4a蛋白抗體 AFP4a
β淀粉樣蛋白前體蛋白結(jié)合蛋白2抗體 APPBP2
核糖核酸酶A10(RNASE10)重組蛋白人大鼠腸上皮細(xì)胞培養(yǎng)基無(wú)花果曲霉 Aspergillus ficuum
金龜子綠僵菌 Metarhizium anisopliae苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
暫無(wú) Clostridium tetryl嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus
人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)基石刁柏(蘆筍)擬莖點(diǎn)霉 Phomopsis asparagi
HCT116/人結(jié)腸細(xì)胞香菇 Lentinula edodes
人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基人肺細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna解脂假絲酵母解脂變種 Candida lipolytica var lipolytica
嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基泡盛曲霉變種 Aspergillus awamori var.
球菌屬 Lactococcus sp.毛鬼傘,雞腿菇 Coprinus comatus
WI-38(人胚肺細(xì)胞)苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
THP-1(人髓系白血病單核細(xì)胞)膠凍樣芽胞桿菌 Bacillus mucilaginosus
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