蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP3)重組蛋白犬

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3)

SL1; STMY; STMY1; STR1; Progelatinase; Stromelysin 1; Transin-1

型號(hào)：GOY-01D63

酶與激酶

腫瘤免疫

感染免疫

心腦血管

物種：Canis familiaris; Canine (Dog，犬)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測(cè)分子量：-

實(shí)際分子量：-(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Alkaline Sphingomyelinase (Alk-Smase)  產(chǎn)品名稱：堿性鞘磷脂磷酸二酯酶(Alk-Smase)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Alkaline Sphingomyelinase (Alk-Smase)  產(chǎn)品名稱：堿性鞘磷脂磷酸二酯酶(Alk-Smase)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Fucosidase Alpha L1, Tissue (FUCa1)  產(chǎn)品名稱：巖藻糖苷酶αL1(FUCa1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Nitric Oxide Synthase 1, Neuronal (NOS1)  產(chǎn)品名稱：神經(jīng)型一氧化氮合酶(NOS1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Nitric Oxide Synthase 1, Neuronal (NOS1)  產(chǎn)品名稱：神經(jīng)型一氧化氮合酶(NOS1)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Nitric Oxide Synthase 2, Inducible (NOS2)  產(chǎn)品名稱：誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(NOS2)重組蛋白物種：Canis familiaris; Canine (Dog，犬)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

載脂蛋白A1結(jié)合蛋白抗體抗體 APOA1BP/AI-BP

脂肪細(xì)胞膜相關(guān)蛋白抗體 APMAP

載脂蛋白B-mRNA編輯酶復(fù)合物1抗體 APOBEC1

載脂蛋白B-mRNA編輯酶復(fù)合物2抗體 APOBEC2

載脂蛋白B-mRNA編輯酶復(fù)合物3B抗體 APOBEC3B

載脂蛋白B-mRNA編輯酶復(fù)合物3C抗體 APOBEC3C

載脂蛋白C1抗體 Apolipoprotein CI/APOC1

載脂蛋白C2抗體 Apolipoprotein CII/APOC2

載脂蛋白L4抗體 APOL4

載脂蛋白L5抗體 APOL5

載脂蛋白L1抗體 APOL1

載脂蛋白M抗體 ApoM

基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP3)重組蛋白犬異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

小單孢菌 Micromonospora sp.地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii鼠桿菌 Lactobacillus murinus

人腺細(xì)胞厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia

A-375(人惡性黑色素瘤細(xì)胞)PBS

中國臺(tái)灣根霉 Rhizopus formosensis青春雙歧桿菌 Bifidobacterium adolensentis

黑木耳 Auricularia auricula鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

核盤菌石狀正青霉 Eupenicillium lapidosum

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum帚石南棒桿菌 Corynebacterium callunae

蘇云金芽胞桿菌莫里遜亞種 Bacillus thuringiensis subsp. Morrisoni大豆慢生根瘤菌

SY5Y/神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞小鼠膀胱上皮細(xì)胞培養(yǎng)基

KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞HEC-1-B(人子宮內(nèi)膜腺細(xì)胞)

狀絲孢酵母 Trichosporon capitatum糖細(xì)黃鏈霉菌 Streptomyces microflavus