蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白大鼠

英文名稱：Recombinant Creatine Kinase, Muscle (CKM)

CK-MM; CKMM; CK3; CK-M; MM-CK; M-CK; Creatine kinase M-type, N-terminally processed

型號：GOY-01D87

酶與激酶

心腦血管

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：Cytoplasm

預(yù)測分子量：41.8kDa

實際分子量：42kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Lys11~Leu367 (Accession # P00564) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：6.6

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Ornithine Transcarbamylase (OTC)  產(chǎn)品名稱：氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OTC)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Ornithine Transcarbamylase (OTC)  產(chǎn)品名稱：氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OTC)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Sorbitol Dehydrogenase (SDH)  產(chǎn)品名稱：脫氫酶(SDH)重組蛋白物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

英文名稱：Recombinant Sorbitol Dehydrogenase (SDH)  產(chǎn)品名稱：脫氫酶(SDH)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Sorbitol Dehydrogenase (SDH)  產(chǎn)品名稱：脫氫酶(SDH)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Endoplasmic Reticulum Resident Protein 57 (ERp57)  產(chǎn)品名稱：蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(ERp57)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

骨涎蛋白 Bone Sialoprotein

BEND2蛋白抗體 BEND2

副溶血性弧菌菌體鞭毛蛋白抗體 Vibrio Parahemolyticus Polar flagellin B/D

BTBD6蛋白抗體 BTBD6

BMP內(nèi)皮細(xì)胞調(diào)節(jié)蛋白抗體 BMPER

丙肝病毒NS5A反轉(zhuǎn)錄蛋白8抗體 HCV NS5A transactivated protein 8

骨形態(tài)發(fā)生蛋白1/膠原C蛋白肽鏈內(nèi)切酶抗體 BMP1

骨形態(tài)發(fā)生蛋白9抗體 BMP9

鈣粘蛋白相關(guān)蛋白受體BTR1抗體 BTR1

有絲分裂蛋白BUB3抗體 Bub3

微管蛋白β輔助因子D抗體 Beta tubulin cofactor D

p60TRP蛋白抗體 BHLHB9/p60TRP

肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白大鼠rCSC, 大鼠心肌細(xì)胞U-2 OS, 人骨肉瘤細(xì)胞

異常漢遜酵母 Hansenula anomala釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

RIN-m5f(大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞)苜蓿中華根瘤菌

枝芽胞桿菌 Virgibacillus sp.酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis

皮狀絲孢酵母 Trichosporon cutaneum酒假絲酵母 Candida kefyr

SHZ-88(大鼠腺細(xì)胞)冠突曲霉 Bacillus thuringiensis

串珠菌 Leuconostoc lactis根瘤菌 Rhizobium sp.

土芽胞桿菌 Sporolactobacillus terrae粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe

宇佐美曲霉 Aspergillus usamii黑木耳 Auricularia auricula

人卵巢透細(xì)胞細(xì)胞人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞

佛羅里達(dá)側(cè)耳 Pleurotus florida釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

無色桿菌屬 Achromobacter sp.假絲酵母屬 Candida sp.

白鏈霉菌 Streptomyces albolongus苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti