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供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號 | GOY-01D145 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh) |
物種 | Bos taurus; Bovine (Cattle,牛) |
公司產品僅供科研實驗、不得用于臨床:
產品名稱 | 蛋白激酶Cη(PKCh)重組蛋白牛 |
物種 | Bos taurus; Bovine (Cattle,牛) |
貨號 | GOY-01D145 |
英文名稱:Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh)
PRKCH; PRKC-H; PKC-L; PRKCL; NPKC-Eta
型號:GOY-01D145
酶與激酶
物種:Bos taurus; Bovine (Cattle,牛)
來源:原核表達
宿主E.coli
內毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::n/a
預測分子量:-
實際分子量:-(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點:-
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
特點:
標記:標記反應簡單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價結合是一種非常簡便、直接的標記方法。
酶標記:酶標記抗體是將酶與特異性抗體經適當方法連接而成,其應用范圍非常廣泛,結果即時可見、敏感性高。
熒光標記:熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標記物之一,產品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團經恰當的激光可發(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細胞水平定位的方法。
使用說明:
如發(fā)現RIPA有沉淀,請放室溫半小時或者常溫水浴使沉淀溶解。
根據使用量,取每1ml RIPA 加入10ul PMSF,使PMSF的最終濃度為1mM?;靹騻溆?(PMSF現用現加)。
1、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞量加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成50-100萬細胞/管,然后再裂解。
c)對于組織樣品: 把成細小的碎片。按照每20mg組織加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。 (如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量)。
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
2、后處理:將裂解后的樣品10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
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注意事項:
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間。
2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構象出現空間障礙。分子間交聯形成的網格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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趨化素樣因子超家族成員3抗體 CKLFH3
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染色質修飾蛋白1B抗體 CHMP1B
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