蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)重組蛋白小鼠

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 12 (MMP12)

MME; HME; ME; Macrophage Metalloelastase; Macrophage Elastase

型號(hào)：GOY-01D186

酶與激酶

腫瘤免疫

感染免疫

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌, 細(xì)胞外基質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量：22.6kDa

實(shí)際分子量：23kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Ala294~Cys473 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：9.3

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Galactose-1-Phosphate Uridylyltransferase (GALT)  產(chǎn)品名稱：半乳糖-1-磷酸尿苷酰轉(zhuǎn)移酶(GALT)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Glucose-6-Phosphatase, Catalytic (G6PC)  產(chǎn)品名稱：葡萄糖-6-磷酸酶催化亞基(G6PC)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Fructosamine-3-Kinase (FN3K)  產(chǎn)品名稱：果糖胺-3-激酶(FN3K)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Electron Transferring Flavoprotein Dehydrogenase (ETFDH)  產(chǎn)品名稱：電子傳遞黃素蛋白脫氫酶(ETFDH)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Eosinophil Peroxidase (EPX)  產(chǎn)品名稱：嗜酸性粒細(xì)胞過(guò)氧化物酶(EPX)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Eosinophil Peroxidase (EPX)  產(chǎn)品名稱：嗜酸性粒細(xì)胞過(guò)氧化物酶(EPX)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

C2CD3蛋白抗體 C2CD3

22號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框43抗體 C22orf43

半胱胺酸蛋白14抗體 Caspase 14

3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框55抗體 C3orf55

3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框65抗體 C3orf65

3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框14抗體 C3orf14

3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框20抗體 C3orf20

3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框23抗體 C3orf23

3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框32抗體 C3orf32

3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框36抗體 C3orf36

3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框31抗體 C3ORF31

3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框38抗體 C3orf38

基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)重組蛋白小鼠人前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基灰色鏈霉菌 Streptomyces griseus

eECL Western Blot Kit/高靈敏度化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒人卵巢腺細(xì)胞

檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia

Poly-L-Lysine Solutiona(5mg/ml)規(guī)格：

奇異變形桿菌 Proteus mirabilis

SW1116(人結(jié)腸腺細(xì)胞)斯氏假單胞菌 Pseudomonas stutzeri

NAMALWA(人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞)GES-1/胃上皮細(xì)胞

嬰兒雙歧桿菌 Bifidobacterium infantis

黃孢平革菌

小鼠前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

HSC-T6(大鼠肝星形細(xì)胞)5×106cells/瓶×2