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鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)重組蛋白人

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2023-03-02 16:00:05瀏覽次數(shù):254次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號 GOY-01D190 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Phospholipase A2, Calcium Independent
物種 Homo sapiens (Human,人)
鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:人纖毛軸動力蛋白重鏈17(DYH17)ELISA試劑盒96T 0.312-20 ng/mL人Dickkopf 相關(guān)蛋白4(Dickkopf-4)ELISA試劑盒96T 0.156-10 ng/mL人損傷調(diào)節(jié)自噬調(diào)節(jié)蛋白1(DRAM1)ELISA試劑盒96T 0.156-10 ng/mL

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

英文名稱:Recombinant Diacylglycerol-O-Acyltransferase Homolog 1 (DGAT1)  產(chǎn)品名稱:二酰甘油-O-?;D(zhuǎn)移酶同源物1(DGAT1)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

英文名稱:Recombinant Diacylglycerol-O-Acyltransferase Homolog 1 (DGAT1)  產(chǎn)品名稱:二酰甘油-O-?;D(zhuǎn)移酶同源物1(DGAT1)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

英文名稱:Recombinant D-Aspartate Oxidase (DDO)  產(chǎn)品名稱:D-天冬氧化酶(DDO)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Di-N-Acetyl Chitobiase (CTBS)  產(chǎn)品名稱:二-N-乙酰殼二糖酶(CTBS)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Catechol-O-Methyltransferase (COMT)  產(chǎn)品名稱:兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Catechol-O-Methyltransferase (COMT)  產(chǎn)品名稱:兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號

鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D190

 

 

產(chǎn)品名稱:鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)重組蛋白人

英文名稱:Recombinant Phospholipase A2, Calcium Independent (iPLA2)

PLA2G6; CaI-PLA2; GVI; INAD1; PNPLA9; Ca2+ Independent PLA2; 85 kDa Calcium-Independent Phospholipase A2; Phospholipase A2,group VI(Cytosolic,Calcium-Independent)

型號:GOY-01D190

酶與激酶

代謝通路

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量:32.0kDa

實(shí)際分子量:29kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Arg484~Ile701 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點(diǎn):9.4

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

鈣調(diào)節(jié)素抗體(鈣調(diào)蛋白/鈣調(diào)素) Calmodulin

半胱胺酸蛋白-7抗體 Caspase-7

1號染色體開放閱讀框181抗體 C1orf181

Ⅰ型補(bǔ)體受體抗體(C3b/C4b受體抗體) CD35

8型膠原/內(nèi)皮膠原蛋白抗體 Collagen VIII alpha 1

結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1抗體 CITED1

細(xì)胞色素P450 2C9抗體 CYP2C9

細(xì)胞色素P450 2D6抗體 CYP2D6

前列環(huán)素合成酶抗體 CYP8A1

軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗體 COMP

血小板活化因子CTR9抗體 CTR9

T淋巴細(xì)胞CD1A抗體 CD1A

鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)重組蛋白人A2780(人卵巢細(xì)胞)A3(人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)

抗生鏈霉菌 Streptomyces antibioticus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

酸球菌 Lactococcus lactis地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

MFC-GFP(小鼠前胃細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記))牛鏈球菌 Streptococcus bovis

紫芝 Ganoderma japonicum香菇 Lentinula edodes

大鼠膀胱成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基LS-174T(人結(jié)腸腺細(xì)胞)

葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum戊糖片球菌 Pediococcus pentosaceus

人胰島β細(xì)胞培養(yǎng)基大鼠腸粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基

柱狀田菇 Agrocybe aegerida施氏漢遜酵母 Hansenula schneggii

鞘氨醇桿菌屬 Sphingobacterium sp.中間假絲酵母 Candida intermedia

人黑色素瘤細(xì)胞白盤孢 Gloeosporium album

大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)人真皮淋巴上皮細(xì)胞培養(yǎng)基

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii小鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基

 


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