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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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M2-型丙酮酸激酶(PKM2)重組蛋白人

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產(chǎn)品型號(hào)

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-02 16:51:45瀏覽次數(shù):430次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D233 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Pyruvate kinase isozymes M2 (PKM2)
物種 Homo sapiens (Human,人)
M2-型丙酮酸激酶(PKM2)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:人IgG-Fc片段結(jié)合蛋白(FcγBP)ELISA試劑盒96T 0.78-50 ng/mL人受體1(FOLR1)ELISA試劑盒96T 15.6-1000 pg/mL人低親和力免Fc區(qū)Ⅲ受體γ(FCG3A)ELISA試劑盒96T 0.312-20 ng/mL

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

英文名稱:Recombinant Hydroxyacid Oxidase 1 (HAO1)  產(chǎn)品名稱:羥酸氧化酶1(HAO1)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

英文名稱:Recombinant Histidine Decarboxylase (HDC)  產(chǎn)品名稱:組脫羧酶(HDC)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

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英文名稱:Recombinant TTK Protein Kinase (TTK)  產(chǎn)品名稱:TTK蛋白激酶(TTK)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

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英文名稱:Recombinant N-Methylpurine DNA Glycosylase (MPG)  產(chǎn)品名稱:N-甲基嘌呤DNA糖基化酶(MPG)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

M2-型丙酮酸激酶(PKM2)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D233

 

 

產(chǎn)品名稱:M2-型丙酮酸激酶(PKM2)重組蛋白人

英文名稱:Recombinant Pyruvate kinase isozymes M2 (PKM2)

M2PK; PKM; M2-PK; PKM1; CTHBP; OIP3; PK3; PKM; TCB; THBP1; Pyruvate kinase muscle isozyme; Thyroid hormone-binding protein 1; Cytosolic thyroid hormone-binding protein; Pyruvate Kinase, Muscle

型號(hào):GOY-01D233

酶與激酶

腫瘤免疫

物種:Homo sapiens (Human,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量:13.4kDa

實(shí)際分子量:13kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽:Lys141~Ala248 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點(diǎn):5.4

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框162抗體 C1orf162

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框159抗體 C1orf159

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框163抗體 C1orf163

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框122抗體 C1orf122

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框123抗體 C1orf123

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框124抗體 C1orf124

2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框3抗體 C2orf3

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框127抗體 C1orf127

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框130抗體 C1orf130

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框131抗體 C1orf131

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框129抗體 C1orf129

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框135抗體 C1orf135

M2-型丙酮酸激酶(PKM2)重組蛋白人小鼠腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基植物桿菌 Lactobacillus plantarum

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum凝結(jié)芽孢桿菌 Bacillus coagulans

鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus香菇 Lentinula edodes

小鼠腎小管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞

桿菌 Lactobacillus sp.無(wú)花果曲霉 Aspergillus ficuum

人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞牛腎細(xì)胞

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus293(人胚腎細(xì)胞)

SDS-PAGE濃膠緩沖液(4x)植物桿菌 Lactobacillus plantarum

泡盛曲霉 Aspergillus awamori金龜子綠僵菌 Metarhizium anisopliae

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae人支氣管上皮細(xì)胞

指狀青霉 Penicillium digitatum小鼠子宮平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

大鼠牙細(xì)胞培養(yǎng)基桿菌屬 Lactobacillus sp.

三葉草根瘤菌 Rhizobium trifoliiNCI-H596(人肺腺鱗細(xì)胞)

 


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