產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：糖原合酶激酶3α(GSK3a)重組蛋白大鼠

英文名稱：Recombinant Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha (GSK3a)

Serine/threonine-protein kinase GSK3A

型號(hào)：GOY-01D240

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

酶與激酶

代謝通路

內(nèi)分泌學(xué)

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測(cè)分子量：37.4kDa

實(shí)際分子量：38kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽：Ile122~Asn416 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：9.0

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Phosphoinositide-3-Kinase Adaptor Protein 1 (PIK3AP1)  產(chǎn)品名稱：磷酸肌醇-3-激酶銜接蛋白1(PIK3AP1)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Phosphoinositide-3-Kinase Class-2-Beta Polypeptide (PIK3C2b)  產(chǎn)品名稱：磷酸肌醇-3-激酶2β肽(PIK3C2b)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Poly ADP Ribose Polymerase (PARP)  產(chǎn)品名稱：多聚ADP核糖聚合酶(PARP)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Superoxide Dismutase Copper Chaperone  產(chǎn)品名稱：銅伴侶超氧化物歧化酶重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha (GSK3a)  產(chǎn)品名稱：糖原合酶激酶3α(GSK3a)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Glutathione S Transferase Mu 3, Brain (GSTm3)  產(chǎn)品名稱：S轉(zhuǎn)移酶μ3(GSTm3)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

內(nèi)臟移位線管蛋白CFC1蛋白抗體 CFC1

Cezanne蛋白抗體 Cezanne

補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白2抗體 CFHL2

補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白4抗體 CFHL4

補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白5抗體 CFHL5

7號(hào)染色體開放閱讀框28A抗體 CG028/C7orf28A

CpG結(jié)合蛋白抗體 CGBP

CGG結(jié)合蛋白1抗體 CGGBP1

結(jié)蛋白樣蛋白CGNL1抗體 CGNL1

細(xì)胞生長(zhǎng)調(diào)節(jié)蛋白CGREF1抗體 CGREF1

cGMP依賴性蛋白激酶2抗體 CGK2

富含軟骨蛋白抗體 CHAD

糖原合酶激酶3α(GSK3a)重組蛋白大鼠苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

青春雙岐桿菌 Bifidobacterium adolescentis同心青霉 Penicillium concentricum

泡盛曲霉 Aspergillus awamori地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

L-O2(人正常肝細(xì)胞)球孢白僵菌 Beauveria bassiana

亞側(cè)耳 Hohenbuehelia serotina三七根腐病菌 Fusarium solani

SPC-A-1(人肺細(xì)胞)HHCC(人肝細(xì)胞)

香菇屬 Lentinula sp.根瘤菌

SW620(人結(jié)腸細(xì)胞)蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

松口蘑 Tricholoma matsutake宛氏擬青霉 Paecilomyces variotii

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis核側(cè)耳 Pleurotus tuber-regium

藍(lán)色預(yù)染中分子量蛋白Marker費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

柄木霉人腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基