蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Granzyme A (GZMA)

CTLA3; HFSP; HF; H factor; Granzyme 1; Fragmentin-1; Hanukkah factor; Cytotoxic T-Lymphocyte-Associated Serine Esterase 3; CTL tryptase; Cytotoxic T-lymphocyte proteinase 1

型號：GOY-01D264

酶與激酶

感染免疫

免疫分子

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：分泌, 細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量：26.9kDa

實際分子量：29kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Ile29~Val260 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：9.4

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Procollagen Lysine-1,2-Oxoglutarate-5-Dioxygenase 1 (PLOD1)  產(chǎn)品名稱：前膠原賴-1,2-酮戊二酸-5-雙加氧酶1(PLOD1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Procollagen Lysine-2-Oxoglutarate-5-Dioxygenase 2 (PLOD2)  產(chǎn)品名稱：前膠原賴-2-酮戊二酸-5-雙加氧酶1(PLOD2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Procollagen Lysine-2-Oxoglutarate-5-Dioxygenase 3 (PLOD3)  產(chǎn)品名稱：前膠原賴-2-酮戊二酸-5-雙加氧酶1(PLOD3)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Tryptophan-2,3-dioxygenase (TDO)  產(chǎn)品名稱：色-2,3-雙加氧酶(TDO)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant B-Lymphoid Tyrosine Kinase (BLK)  產(chǎn)品名稱：B-淋巴激酶(BLK)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Muscle, Skeletal, Receptor Tyrosine Kinase (MUSK)  產(chǎn)品名稱：骨骼肌特異性受體激酶(MUSK)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

神經(jīng)網(wǎng)蛋白CopineVI抗體 Copine-6

轉(zhuǎn)錄激活蛋白CRSP9抗體 CRSP9

腦型肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1C抗體 Cpt1c

補體因子B抗體 Factor B

乙酰受體前體蛋白AChRα1抗體 CHRNA1

豬瘟病毒包膜糖蛋白E2抗體 CSFV Envelope glycoprotein E2

冷休克結(jié)構(gòu)域蛋白C2抗體 CSDC2

碳酸酐酶10抗體 CA10

致癌基因C-Myc抗體 C-Myc

膽囊收縮素8抗體 CCK8

L選擇素抗體 CD62L

上皮鈣粘附分子抗體 E cadherin

顆粒酶A(GZMA)重組蛋白小鼠解烴棒桿菌 Corynebacterium nydrocarboclastus地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

人角膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基卵孢白僵菌 Beauveria brongniartii

BRL-3A(大鼠正常肝細(xì)胞)大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

Saos-2，人成骨肉瘤細(xì)胞A875(人黑色素瘤細(xì)胞)

植物桿菌 Lactobacillus plantarum塔賓曲霉 Aspergillus tubingensis

金龜子綠僵菌 Metarhizium anisopliae黑木耳 Auricularia auricula

人脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

中性紅染色液側(cè)耳 Pleurotus sp.

rEPC，大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

CoC1/DDP(人卵巢耐藥細(xì)胞亞株)骨肉瘤

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactisSK-N-SH, 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

檸檬形克勒克酵母 Kloeckera opiculata銅綠假單胞菌 Pseudomonas aeruginosa

香菇 Lentinula edodes苜蓿中華根瘤菌