蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Caspase 8 (CASP8)

CAP4; FLICE; MACH; MCH5; Cysteinyl Aspartate Specific Proteinases 8; Apoptotic cysteine protease; FADD-homologous ICE/ced-3-like protease; MORT1-associated ced-3 homolog

型號(hào)：GOY-01D349

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

酶與激酶

細(xì)胞凋亡

腫瘤免疫

神經(jīng)科學(xué)

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量：22.8kDa

實(shí)際分子量：25kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Ser217~Asp384 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：6.0

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Endothelin Converting Enzyme 1 (ECE1)  產(chǎn)品名稱：內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Thioredoxin Reductase 1 (TXNRD1)  產(chǎn)品名稱：硫氧還蛋白還原酶1(TXNRD1)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Aminopeptidase A (ENPEP)  產(chǎn)品名稱：谷氨氨肽酶(ENPEP)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Endothelial NOS (eNOS)  產(chǎn)品名稱：內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)重組蛋白物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

英文名稱：Recombinant Prostaglandin E Synthase 2 (PTGES2)  產(chǎn)品名稱：前列腺素E合酶2(PTGES2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Mitogen Activated Protein Kinase Kinase Kinase 1 (MAP3K1)  產(chǎn)品名稱：絲裂原激活蛋白激酶激酶激酶1(MAP3K1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

磷酸化原癌基因c-Jun抗體 phospho-c-Jun(Ser63)

9號(hào)染色體開放閱讀框116抗體 C9orf116

磷酸化CREB-1抗體 phospho-CREB-1(Ser133)

1號(hào)染色體開放閱讀框229抗體 C1orf229

殺菌肽/天蠶抗菌肽抗體 Cecropin

Cullin 4a蛋白抗體 Cullin 4A

細(xì)胞角蛋白3抗體 CK3

5號(hào)染色體開放閱讀框52抗體 C5orf52

緊密連接蛋白14抗體 Claudin 14

人巨細(xì)胞病毒單克隆抗體 CMV(1F11)

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白85B抗體 CCDC85B

癌胚抗原抗體 CEA

胱天蛋白酶8(CASP8)重組蛋白人小鼠肝細(xì)胞珊瑚色諾卡氏菌 Nocardia coralline

T24, 人膀胱細(xì)胞白腐盾殼霉

巴氏梭菌 Clostridium pasteurianus豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

熱帶假絲酵母 Candida tropicalisCOLO 205(人結(jié)腸細(xì)胞)

短小芽胞桿菌 Bacillus pumilus尖孢鐮刀菌棉花?；?Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectum

異常畢赤酵母 Pichia anomala中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

HNE2, 人鼻咽細(xì)胞系人絨毛膜細(xì)胞

費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii挪威假絲酵母 Candida norvegensis

WISH(人羊膜細(xì)胞)嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus人骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)基

Molt-4/急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞阿舒假囊酵母 Crebrothecium ashbyii

根瘤菌 Rhizobium sp.豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae蘇云金芽胞桿菌庫爾斯塔克亞種 Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki