蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

英文名稱：Recombinant Phosphoenolpyruvate Carboxykinase 1, Soluble (PCK1)

PEPCK1; PEPCKC; Cytosolic Phosphoenolpyruvate Carboxykinase; Phosphoenolpyruvate carboxykinase, cytosolic [GTP]

型號：GOY-01D376

酶與激酶

代謝通路

內分泌學

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：細胞質

預測分子量：31.9kDa

實際分子量：27kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Ile312~Ala563 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：7.8

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

英文名稱：Recombinant Integrin Linked Kinase (ILK)  產品名稱：整合素連鎖激酶(ILK)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Adenylate Kinase 2 (AK2)  產品名稱：腺苷酸激酶2(AK2)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Coenzyme Q6 Homolog, Monooxygenase (COQ6)  產品名稱：輔酶Q6同源物A(COQ6)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Glutathione S Transferase Mu 4 (GSTm4)  產品名稱：S轉移酶μ4(GSTm4)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Protein O-Mannosyltransferase 1 (POMT1)  產品名稱：蛋白O-甘露糖基轉移酶1(POMT1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Cluster Of Differentiation 38 (CD38)  產品名稱：CD38分子(CD38)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

二肽基肽酶10抗體 DPP10

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苜蓿中華根瘤菌

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

大鼠神經元細胞培養(yǎng)基100mL

小鼠淋巴管內皮細胞培養(yǎng)基100mL

農桿菌 Agrobacterium sp.假單胞菌 Pseudomonas sp.