蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Ubiquitin Conjugating Enzyme E2A (UBE2A)

UBC2; HHR6A; RAD6 Homolog; Ubiquitin carrier protein A; Ubiquitin-protein ligase A

型號(hào)：GOY-01D393

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

酶與激酶

發(fā)育科學(xué)

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞核

預(yù)測(cè)分子量：21.0kDa

實(shí)際分子量：21kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Met1~Cys152 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：4.8

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Threonine Aspartase 1 (TASP1)  產(chǎn)品名稱：天冬1(TASP1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Tec Protein Tyrosine Kinase (TEC)  產(chǎn)品名稱：Tec蛋白激酶(TEC)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Tec Protein Tyrosine Kinase (TEC)  產(chǎn)品名稱：Tec蛋白激酶(TEC)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Testis Specific Kinase 1 (TESK1)  產(chǎn)品名稱：睪丸特異性激酶1(TESK1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Testis Specific Kinase 1 (TESK1)  產(chǎn)品名稱：睪丸特異性激酶1(TESK1)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Three Prime Repair Exonuclease 1 (TREX1)  產(chǎn)品名稱：三素修復(fù)核酸外切酶1(TREX1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

脫帽酶1A抗體 DCP1A

冷休克蛋白DBPA抗體 DBPA

清道夫脫帽酶/熱休克蛋白1抗體 DCPS

干擾素調(diào)節(jié)因子4結(jié)合蛋白抗體 DEF6/IBP

DNA交聯(lián)修復(fù)蛋白1C抗體 DCLREC1C

磷酸化凋亡相關(guān)蛋白激酶2抗體 phospho-DAP Kinase 2 (Ser318)

凋亡相關(guān)蛋白激酶樣蛋白1抗體 DAPL1

磷酸化凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗體 phospho-DAP Kinase 1 (Ser 308)

雙特異性磷酸化調(diào)節(jié)激酶DYRK2抗體 DYRK2

鋅指結(jié)構(gòu)20抗體 DHHC-20

牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1抗體 DMP1

C型凝集素受體CLEC13A抗體 DCL-1

泛素結(jié)合酶E2A(UBE2A)重組蛋白小鼠人胚肺成纖維細(xì)胞英文名稱：KMB17

緩沖-甘油鈉溶液 規(guī)格： 250g 用途： 用于樣品的保存。（GB 4789.13-2010）

肝浸粉（牛）/牛肝浸粉/肝消化物/Liver extract powder(Beef)BR250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

磷脂酶A2激活蛋白(PLAA)重組蛋白英文名稱：Recombinant Phospholipase A2 Activating Protein (PLAA)

卵黃高鹽基礎(chǔ)/Egg-Yolk Salt Agar Base藥品、生物制品選擇性分離250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

多巴胺受體D3(DRD3)重組蛋白英文名稱：Recombinant Dopamine Receptor D3 (DRD3)

乙酰羧化酶α(ACACα)重組蛋白英文名稱：Recombinant Acetyl Coenzyme A Carboxylase Alpha (ACACa)

亞鉍(BS) 規(guī)格： 250g 用途： 用于腸道致病菌特別是沙門(mén)氏菌和志賀氏菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB/T4789.28－2003 中4.20，GB/T4789....

人前列腺細(xì)胞英文名稱：22RV1

中性(含10mL酶解緩沖液)1mL

MDA-MB-436(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2