蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Protein Disulfide Isomerase (PDI)

PDI-A2; PDA2, PDIA2, PDIR; PDIP; Protein Disulfide Isomerase,Pancreatic; Protein Disulfide Isomerase-Associated 2; Pancreas-specific protein disulfide isomerase

型號(hào)：GOY-01D485

酶與激酶

代謝通路

肝膽病學(xué)

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：Endoplasmic reticulum lumen

預(yù)測(cè)分子量：27.4kDa

實(shí)際分子量：27.32kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Gly46~Ser258 (Accession # D3Z6P0) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：5.5

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Ectonucleotide Pyrophosphatase/Phosphodiesterase 3 (ENPP3)  產(chǎn)品名稱：外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶3(ENPP3)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Cysteinyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (CARS2)  產(chǎn)品名稱：半胱氨酰tRNA合成酶2(CARS2)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Enterokinase (ENTK)  產(chǎn)品名稱：腸激酶(ENTK)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Fructose-1,6-Bisphosphatase 2 (FBP2)  產(chǎn)品名稱：果糖-1,6-二磷酸酶2(FBP2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Pregnancy Up Regulated Non Ubiquitously Expressed CaM Kinase (PNCK)  產(chǎn)品名稱：妊娠上調(diào)節(jié)非廣泛表達(dá)CaM激酶(PNCK)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Phosphoglycerate Kinase 2 (PGK2)  產(chǎn)品名稱：磷酸甘油酸酯激酶2(PGK2)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子8抗體 FGF8

叉頭蛋白P3抗體 FoxP3

肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Fascin抗體 Fascin

線粒體裂變1蛋白抗體 FIS1

叉頭蛋白P1抗體 FoxP1

鼠疫F1蛋白/鼠疫耶爾森氏菌莢膜抗原F1單克隆抗體 F1 protein (YERSINIA PESTIS)

纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子5抗體 FGF5

脆性X綜合征相關(guān)蛋白AFF1抗體 FMR1

線粒體型共濟(jì)失調(diào)蛋白抗體 Frataxin

FC段IgE受體α多肽抗體 Fc ε RIα

感覺(jué)神經(jīng)蛋白1抗體 FAM84A

FAM81A蛋白抗體 FAM81A

蛋白二硫化物異構(gòu)酶A2(PDI)重組蛋白小鼠SGC7901(人胃細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

牛腎細(xì)胞英文名稱：MDBK (NBL-1)

哥倫比亞培養(yǎng)基 規(guī)格： 250g 用途： 用于營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)，還用于藥品中梭菌的檢測(cè)。(《中華人民共和國(guó)藥典》201...

高轉(zhuǎn)移人肝細(xì)胞英文名稱：MHCC97-H

胰蛋白胨大豆培養(yǎng)基 規(guī)格： 250g 用途： 用于普通的或營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)，還用于醫(yī)藥工業(yè)潔凈室無(wú)菌程度的監(jiān)測(cè)及消毒劑消毒效果的...

補(bǔ)體成分2(C2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Complement Component 2 (C2)

BDS培養(yǎng)基/BDS Medium擬桿菌的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

粘蛋白1(MUC1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Mucin 1 (MUC1)

Nitsch培養(yǎng)基(含維生素)/Nitsch Medium with vitaminsBR10升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

無(wú)翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員4(WNT4)重組蛋白英文名稱：Recombinant Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 4 (WNT4)