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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-06 11:36:42瀏覽次數(shù):162次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號 | GOY-01D503 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Prostaglandin D2 Synthase (PTGDS) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
前列腺素D合酶(PTGDS)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D503 |
英文名稱:Recombinant Prostaglandin D2 Synthase (PTGDS)
HPGDS; GSTS; H-PGDS; PDS; PGD2; PGDS; PGDS2; Glutathione S-Transferase Sigma; Glutathione-requiring prostaglandin D synthase; Prostaglandin D2 Synthase, Hematopoietic
型號:GOY-01D503
酶與激酶
內(nèi)分泌學
心腦血管
神經(jīng)科學
激素代謝
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::細胞質(zhì)
預測分子量:27.0kDa
實際分子量:27kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Met1~Leu199 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點:5.5
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
以下是相關產(chǎn)品:
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英文名稱:Recombinant 5-Methyltetrahydrofolate Homocysteine Methyltransferase (MTR) 產(chǎn)品名稱:5-甲基四氫高半甲基轉(zhuǎn)移酶(MTR)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
英文名稱:Recombinant Deoxyhypusine Hydroxylase/Monooxygenase (DOHH) 產(chǎn)品名稱:脫氧輔蛋白羥化酶/單加氧酶(DOHH)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
英文名稱:Recombinant Doublecortin Like Kinase 2 (DCLK2) 產(chǎn)品名稱:雙腎上腺皮質(zhì)激素樣激酶2(DCLK2)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Adaptor Associated Protein Kinase 1 (AAK1) 產(chǎn)品名稱:銜接因子關聯(lián)蛋白激酶1(AAK1)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
英文名稱:Recombinant Betaine Homocysteine Methyltransferase 2 (BHMT2) 產(chǎn)品名稱:甜菜堿高半甲基轉(zhuǎn)移酶2(BHMT2)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
脂肪酸結(jié)合蛋白5抗體(上皮細胞型) FABP5
FXYD離子轉(zhuǎn)運調(diào)節(jié)因子7抗體 FXYD7
脂氧素受體1抗體 FPRL1
半8相關蛋白2抗體 FLASH
叉頭蛋白F1抗體 FOXF1
高嗜酸性粒細胞綜合癥相關蛋白FIP1L1抗體 FIP1L1
叉頭蛋白D4 FOXD4
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FMS樣激酶3配體抗體 FLT3L
F-box富含重復蛋白4抗體 FbxL4
磷酸化細絲蛋白A抗體 phospho-Filamin A (Ser1083)
免E受體Fc ε RIγ抗體 FCER1G
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3% NaC1脫羧酶發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口
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U-2 OS(人骨肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2
人小腦顆粒細胞培養(yǎng)基100mL
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十六烷基三甲基/假單胞菌屬選擇/Cetrimide Agar用于綠膿桿菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
骨成型蛋白受體1B(BMPR1B)重組蛋白英文名稱:Recombinant Bone Morphogenetic Protein Receptor 1B (BMPR1B)
四環(huán)素檢定/Tetracyline Examination Agar副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
單核細胞趨化蛋白2(MCP2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Monocyte Chemotactic Protein 2 (MCP2)
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