蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻?hù)要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱(chēng)：Recombinant Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase (GAPDH)

G3PD; GAPD; Peptidyl-cysteine S-nitrosylase GAPDH

型號(hào)：GOY-01D555

酶與激酶

代謝通路

心腦血管

肝膽病學(xué)

營(yíng)養(yǎng)代謝

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測(cè)分子量：17.5kDa

實(shí)際分子量：18kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Gly2~Ser148 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：8.8

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱(chēng)：Active Catalase (CAT)  產(chǎn)品名稱(chēng)：過(guò)氧化氫酶(CAT)活性蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱(chēng)：Active Acid Sphingomyelinase (ASM)  產(chǎn)品名稱(chēng)：酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)活性蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱(chēng)：Active Acid Sphingomyelinase (ASM)  產(chǎn)品名稱(chēng)：酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)活性蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱(chēng)：Active Histone Deacetylase 6 (HDAC6)  產(chǎn)品名稱(chēng)：組蛋白脫乙?；?(HDAC6)活性蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱(chēng)：Active Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial (SOD2)  產(chǎn)品名稱(chēng)：線(xiàn)粒體超氧化物歧化酶(SOD2)活性蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱(chēng)：Active Superoxide Dismutase 1 (SOD1)  產(chǎn)品名稱(chēng)：超氧化物歧化酶1(SOD1)活性蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

高爾基體膜相關(guān)蛋白6樣蛋白4抗體 GOLGA6L4

糖脂轉(zhuǎn)移蛋白結(jié)構(gòu)域2抗體 GLTPD2

胞漿區(qū)相關(guān)蛋白GIPC2抗體 GIPC-2

糖基轉(zhuǎn)移酶8結(jié)構(gòu)域1抗體 GLT8D1

促代謝型受體2抗體 Metabotropic Glutamate Receptor 2

G蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體 GPKOW

β1-6 N-乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移酶6抗體 GCNT6

?；撬?/span>/β-氨基乙磺酸抗體 Gibberellins

核苷酸結(jié)合蛋白X抗體 GNRPX

GRAM結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 GRAMD2

赤抗體 Gibberellins

γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶輕鏈2抗體 GGTLC2

甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)重組蛋白人小鼠骨髓瘤細(xì)胞英文名稱(chēng)：FO

腦型肌酸激酶(CKB)天然蛋白英文名稱(chēng)：Native Creatine Kinase, Brain (CKB)

人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱(chēng)：HUVEC

肌紅蛋白(MYO)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Myoglobin (MYO)

人氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

SK-MEL-1(人皮膚黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

AsPC-1(人胰腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

CLED培養(yǎng)基/溴百里酚藍(lán)糖/CLED Medium/BROLACIN Agar/Bromothymol-blue Lactose Cystine Agar/Cystine-Lactose-Electrolyte Deficient Agar尿液中微生物的選擇性分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

HFL1(人肺成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

L-營(yíng)養(yǎng)配套試劑 規(guī)格： 10支/盒 用途： L-營(yíng)養(yǎng)基礎(chǔ)配套試劑

酸桿菌選擇性/Lactobacillus Selective Agar用于酸菌檢測(cè)和分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口