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當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>蛋白>>重組蛋白/RP>> 磷脂酶D(PLD)重組蛋白人
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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-08 12:17:50瀏覽次數(shù):225次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號 | GOY-01D591 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Phospholipase D (PLD) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
磷脂酶D(PLD)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D591 |
英文名稱:Recombinant Phospholipase D (PLD)
PLD1; Choline Phosphatase 1; Phosphatidylcholine-hydrolyzing phospholipase D1
型號:GOY-01D591
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
酶與激酶
代謝通路
營養(yǎng)代謝
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::細胞膜, 細胞質(zhì), 高爾基體, 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔
預(yù)測分子量:43.4kDa
實際分子量:43kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Thr725~Thr1074 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點:5.7
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
產(chǎn)品名稱:肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白 物種:Sus scrofa; Porcine (Pig,豬) 英文名稱:Recombinant Creatine Kinase, Muscle (CKM)
產(chǎn)品名稱:肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白 物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 英文名稱:Recombinant Creatine Kinase, Muscle (CKM)
產(chǎn)品名稱:肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白 物種:Oryctolagus cuniculus (Rabbit,兔) 英文名稱:Recombinant Creatine Kinase, Muscle (CKM)
產(chǎn)品名稱:核糖核酸酶T2(RNASET2)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Ribonuclease T2 (RNASET2)
產(chǎn)品名稱:核糖核酸酶T2(RNASET2)重組蛋白 物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 英文名稱:Recombinant Ribonuclease T2 (RNASET2)
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白2抗體 GIT2
間隙連接蛋白10抗體 GJA10
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間隙連結(jié)蛋白31.9抗體 GJC1
甘油激酶2抗體 GK2
間隙連結(jié)蛋白50/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體 GJA8
β-半乳糖苷酶1/β-Gal/彈性蛋白受體1抗體 GLB1
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R 1610(倉鼠肺細胞)5×106cells/瓶×2
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大鼠肝細胞英文名稱:BRL
脫脂奶蔗糖胰蛋白胨 規(guī)格: 250g 用途: 用于致病性嗜水氣單胞菌的脫脂奶平板試驗(GB/T 18652-2002)。
神經(jīng)母細胞瘤英文名稱:LAN-6
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血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)重組蛋白英文名稱:Recombinant Angiotensin I Converting Enzyme (ACE)
LB營養(yǎng)/LB Nutrient Agar用于發(fā)酵工程、基因工程和分子生物學(xué)中大腸桿菌的培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
性別決定區(qū)Y框蛋白2(SOX2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Sex Determining Region Y Box Protein 2 (SOX2)
VRBG/結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖/VRBGA/Violet Red Bile Glucose Agar/VRBG Agar奶粉中坂崎桿菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
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