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不同細(xì)胞培養(yǎng)基的除菌方式及注意事項2017/5/4
細(xì)胞系培養(yǎng)基滅菌的方式分為高壓滅菌和膜過濾除菌，不同的培養(yǎng)基由于其營養(yǎng)成份不同，滅菌方式也可能不同。絕大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)基不適宜高壓滅菌。因為高壓滅菌易破壞細(xì)胞培養(yǎng)基中的一些成份，如某些維生素等，因此，在...
人外周T細(xì)胞的分離與鑒定2017/4/27
材料：淋巴細(xì)胞株懸液、1%SRBC懸液、滅活之小牛血清、離心管、試管、吸管、載玻片、0.8%戊二醛、瑞氏染液。方法（1）取上述配好之淋巴細(xì)胞懸液0.1ml于潔凈小試管中，加入1%SRBC懸液0.1ml...
原代細(xì)胞培養(yǎng)實驗器具清洗步驟2017/4/25
原代細(xì)胞實驗器具清洗l玻璃類1、主要有：培養(yǎng)瓶，血清瓶，小青瓶，移液管，離心管，試管，培養(yǎng)皿等。2、清洗步驟：泡在含有洗潔凈的自來水中→撈出來用毛刷將實驗器具各個面刷洗至少25遍→自來水沖洗25遍→過...
影響哺乳動物細(xì)胞復(fù)蘇的因素2017/4/20
影響哺乳動物原代細(xì)胞復(fù)蘇的因素包括：（a）細(xì)胞類型，（b）生長階段，（c）細(xì)胞處于細(xì)胞周期的哪個階段，（d）終懸液中的細(xì)胞數(shù)量和濃度?？赏ㄟ^優(yōu)化以上因素來提高復(fù)蘇細(xì)胞活力，另外，還需考慮凍存保護(hù)劑的特...
神經(jīng)細(xì)胞分散培養(yǎng)2017/4/18
（一）細(xì)胞系選材常用胚胎動物或新生鼠神經(jīng)組織。雞胚常用胚齡6-8d，新生鼠或胎鼠（12-14d）或人胚胎。不過也有認(rèn)為與組織相關(guān)。如大白鼠胚胎以19d為宜，小鼠以18d為宜，大鼠紋狀體以10d為宜；若...
巨核細(xì)胞基本生理功能分析2017/4/13
巨核細(xì)胞株雖然在骨髓的造血細(xì)胞中為數(shù)zui少，僅占骨髓有核細(xì)胞總數(shù)的0.05%，但其產(chǎn)生的血小板卻對機(jī)體的止血功能極為重要。每個巨核細(xì)胞均可產(chǎn)生1000-6000個血小板。生成血小板的巨核細(xì)胞也是從骨...
原代細(xì)胞核的分離提取2017/4/11
(一)原代細(xì)胞操作步驟1．用頸椎脫位的方法處死小白鼠后，迅速剖開腹部取出肝臟，剪成小塊(去除結(jié)締組織)盡快置于盛有0.9％NaCl的燒杯中，反復(fù)洗滌，盡量除去血污，用濾紙吸去表面的液體。2．將濕重約1...
程序降溫盒提高細(xì)胞凍存的存活率的方法2017/4/6
1.細(xì)胞系實驗室凍存盒平時放4度，需要凍細(xì)胞時直接拿出來用就可以了。第二天轉(zhuǎn)移至液氮，貴重的細(xì)胞盡快轉(zhuǎn)移，不然會影響復(fù)蘇成活率的。一般是用5次就更換一下異丙醇。現(xiàn)在也有一些商品化凍存液可以直接丟進(jìn)-8...
原代細(xì)胞培養(yǎng)玻璃器皿的清洗2017/4/1
①原代細(xì)胞浸泡：新購進(jìn)的玻璃器皿常帶有灰塵，呈弱堿性，或帶有鉛、碑等有害物質(zhì)，故先用自來水浸泡、水洗，然后再用2%~5%鹽酸浸泡或煮沸30min，水洗。要領(lǐng)：培養(yǎng)用后的玻璃器皿要立即泡入清水中，使下道...
原代細(xì)胞線粒體膜勢能的檢測2017/3/30
原代細(xì)胞線粒體在細(xì)胞凋亡的過程中起著樞紐作用，多種細(xì)胞凋亡刺激因子均可誘導(dǎo)不同的細(xì)胞發(fā)生凋亡，而線粒體跨膜電位的下降，被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡級聯(lián)反應(yīng)過程中zui早發(fā)生的事件，它發(fā)生在細(xì)胞核凋亡特征(染色質(zhì)濃...
哺乳動物轉(zhuǎn)錄調(diào)控原理分析2017/3/28
細(xì)胞系RNA聚合酶II是三大RNA聚合酶之一，存在于基因轉(zhuǎn)錄裝置的核心位置，編碼蛋白質(zhì)基因的轉(zhuǎn)錄受到RNA聚合酶的調(diào)控。RNA聚合酶解開DNA雙鏈，沿著一條鏈移動。在移動過程中，它們一邊“解讀”DNA...
過氧化物酶標(biāo)記測定法原理2017/3/23
腫瘤細(xì)胞原理：脫氧核糖核苷酸衍生物地高辛[(digoxigenin)-11-dUTP]在TdT酶的作用下,可以摻入到凋亡細(xì)胞雙鏈或單鏈DNA的3-OH末端,與dATP形成異多聚體,并可與連接了報告酶(...
新生小鼠頸上交感神經(jīng)元分散細(xì)胞培養(yǎng)2017/3/21
原代細(xì)胞交感神經(jīng)系統(tǒng)在維持機(jī)體的正常功能和對環(huán)境的適應(yīng)性反應(yīng)中起著十分重要的作用。交感神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)特別有助于神經(jīng)細(xì)胞發(fā)育和可塑性研究，利用體外培養(yǎng)系統(tǒng)可進(jìn)行交感神經(jīng)細(xì)胞的發(fā)生、死亡、形態(tài)和生化發(fā)育、遞...
常見的細(xì)胞因子受體檢測的方法介紹2017/3/16
（一）活細(xì)胞系吸收試驗原理將過量的待測細(xì)胞與*細(xì)胞因子共孵育，若細(xì)胞膜表面存在相應(yīng)的細(xì)胞因子受體即可結(jié)合細(xì)胞因子，通過測定前、后細(xì)胞因子生物活性的對比情況可推測待測細(xì)胞表面細(xì)胞因子受體是否存在。方法1...
原代細(xì)胞計數(shù)的操作步驟2017/3/14
（一）原代細(xì)胞計數(shù)1、將血球計數(shù)板及蓋片用擦試干凈，并將蓋片蓋在計數(shù)板上。2、將細(xì)胞懸液吸出少許，滴加在蓋片邊緣，使懸液充滿蓋片和計數(shù)板之間。3、靜置3分鐘。4、鏡下觀察，計算計數(shù)板四大格細(xì)胞總數(shù)，壓...
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