【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請仔細閱讀購買說明！

產(chǎn)品名稱：異檸檬酸裂解酶（ICL)測試盒規(guī)格

規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣

測試方法:微量法、紫外分光光度法

貨號：YS-01S6706

測定意義

ICL（EC4.1.3.1）主要存在于植物和微生物中，油料作物種子在萌發(fā)過程中，通過乙醛酸循環(huán)及其他過程將脂肪轉(zhuǎn)變成碳水化合物。ICL是乙醛酸循環(huán)的關(guān)鍵酶之一。

測定原理：

ICL催化異檸檬酸降解為乙醛酸和琥珀酸，乙醛酸和NADH在LDH的作用下生成乙醇和NAD，NADH在340nm下有特征吸收峰，監(jiān)測340nm吸光度的減小速率可間接反應ICL活性。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達2.000ml。

2）. 過濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 。

4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

特點:

(1)應用廣泛

由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應學科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡合物和各種表面活性劑的應用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致*是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。

(4)準確度高

對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預富集后)。

(6)分析成本低、操作簡便、快速

H2AX peptide 組蛋白H2AX多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

SOD1 SOD1 / Superoxide Dismutase 兔單抗 (FITC) Human

Rhesus antibody Rh phospho-c-Raf(Ser494) 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 規(guī)格 0.1ml

改良Western及IP細胞裂解液 100ml

Phospho-ZAP70 (Tyr493) 英文名稱： 磷酸化zeta相關(guān)蛋白70抗體 0.1ml

DYX2/KIAA0319 英文名稱： 閱讀障礙相關(guān)蛋白DLX2抗體 0.2ml

SOD1 SOD1 / Superoxide Dismutase 兔單抗 (FITC) Human

FOXJ1/HFH-4 peptide 插頭蛋白J1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

CA10 Carbonic Anhydrase X / CA10 鼠單抗 (PE) Human

Rhesus antibody Rh phospho-Dnmt1(Ser732) 磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 規(guī)格 0.1ml

ECL化學發(fā)光顯色液(A和B各50ml) 套

ZAR1 英文名稱： 受精卵抑制蛋白1抗體 0.2ml

phospho-Dishevelled 2 (Ser143) 英文名稱： 磷酸化蓬亂蛋白2抗體 0.1ml

CA10 Carbonic Anhydrase X / CA10 鼠單抗 (PE) Human

Septin 8 英文名稱： 細胞分化蛋白SEPT8抗體 0.2ml

Phospho-HER2 (Tyr1221) 英文名稱： 磷酸化HER2受體抗體 0.1ml

5-羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白抗體 Anti-5-HTT/SERT 0.1ml

Anti-VWF/RBITC 紅色羅丹明標記血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-FRAP1/mTOR(Ser2448) 磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

CLCA4(Calcium-activated chloride channel 4) 鈣激活氯離子通道4抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
異檸檬酸裂解酶（ICL)測試盒規(guī)格甲基(分析標準品)獐牙菜苦苷組織IGF-1R酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

硫磷標準溶液(1.00mg/mL,基體：甲)肉桂酸INSULIN R酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

殘殺威標準溶液(100μg/ml,u=2%)蘆薈苷組織INSULIN R酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

草甘膦(分析標準品,99.5%)桉油精ITK酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

草甘膦標準溶液(100μg/ml,u=2%)檀香油組織ITK酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

草甘膦標準溶液(10μg/ml,u=2%)4-甲氧基JAK3酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

氧化標準溶液(100μg/ml,u=6～5%，基體：酮)對二甲氨基苯甲組織JAK3酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

(分析標準品,99%)對羥基丁酯LCK酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。