約翰霍普金斯大學Stephen J Meltzer于2022年11月30日發(fā)表在SCIENCE TRANSLATIONAL MEDICINE（19.319/Q1）上題為“Generation and multiomic profiling of a TP53/CDKN2A double-knockout gastroesophageal junction organoid model"的文章，TP53和CDKN2A的失活發(fā)生在賁門（GEJ）腫瘤發(fā)生早期，但前期缺少賁門向賁門癌轉化的模型，本研究通過類器官和基因編輯相結合，在正常賁門類器官模型上，把TP53/CDKN2A基因雙敲除，模擬了癌癥轉化過程包括代謝和表觀基因組等變化，為腫瘤研究及臨床治療缺少合適模型時，提供了新的思路。
研究項目背景：
TP53和CDKN2A的失活發(fā)生在賁門（GEJ）腫瘤發(fā)生早期。由于缺乏GEJ特異性疾病模型，尚未研究TP53和CDKN2A在GEJ失活的癌癥促進影響。本研究通過野生型原代人GEJ類器官模型和CRISPR-Cas9介導的TP53和CDKN2A雙敲除編輯的轉化GEJ類器官模型。雙基因敲除的GEJ類器官體外形態(tài)表現發(fā)育不良、具有原腫瘤特征以及能夠小鼠體內成瘤。
脂質組學分析成功篩查到變化較顯著的脂質—血小板活化因子（PTAF）。通過siRNA干擾或抑制劑（WEB2086）抑制PTAF/PTAF受體減弱了TP53/CDKN2A基因敲除類器官的增殖和體內成瘤。TP53/CDKN2A雙重失活破壞了轉錄組和DNA甲基組，特別是FOXM1。FOXM1通過與PTAF受體啟動子結合激活PTAFR轉錄，進一步擴增PTAF-PTAFR途徑。
研究路線圖：
研究結果：
1、人正常賁門類器官的建立和表性特征
2、TP53/CDKN2A雙基因敲除促進賁門類器官的增殖、增生和腫瘤轉化
3、脂質組學MALDI-IMS測序：在TP53/CDKN2AKO賁門類器中篩選到PTAF變化較顯著
4、通過siRNA干擾和抑制劑WEB2086抑制PTAF/PTAF表達，達到抑制TP53/CDKN2AKO賁門類器官增值和小鼠體內成瘤
5、DNA甲基組和轉錄組測序：篩選到FOX家族在雙敲除腫瘤類器官中低甲基化較顯著的序列之一
6、ChIP-seq功能驗證：FOXM1與PTAFR啟動子的直接結合，增強GEJ類器官中的PTAFR表達和增殖
本研究中，通過基因編輯對兩種關鍵的抑癌基因進行敲除，成功誘導賁門類器官向腫瘤方向轉化，構建賁門-賁門癌轉化類器官模型，為腫瘤早期發(fā)生發(fā)展的探索提供了新的方向，也為后續(xù)其他臨床疾病研究提供了造模的新方向，造模的新方向—類器官模型。
今天講解就到這了，大家如有類器官問題，歡迎公眾號后臺“愛必信生物"留言哦！
本期小愛推薦：
貨號 | 品名 | 規(guī)格 |
abs9444 | Organotial人肝癌類器官培養(yǎng)基試劑盒 | 1kit |
abs9445 | Organotial人結直腸癌類器官培養(yǎng)基試劑盒 | 1kit |
abs9443 | Organotial人肺癌類器官培養(yǎng)基試劑盒 | 1kit |
abs9449 | Organotial人胃癌類器官培養(yǎng)基試劑盒 | 1kit |
abs9447 | Organotial人胰腺癌類器官培養(yǎng)基試劑盒 | 1kit |
abs9589 | Organotial人鼻咽癌類器官培養(yǎng)基試劑盒 | 1kit |
abs9446 | Organotial人乳腺癌類器官培養(yǎng)基試劑盒 | 1kit |
abs9558 | Organotial人卵巢癌類器官培養(yǎng)基試劑盒 | 1kit |
abs9590 | Organotial人宮頸癌類器官培養(yǎng)基試劑盒 | 1kit |
abs9448 | Organotial人子宮內膜癌類器官培養(yǎng)基試劑盒 | 1kit |
abs9739 | Organotial人腦膠質瘤類器官培養(yǎng)基試劑盒 | 1kit |
好消息！Absin文獻獎勵重磅升級！
Absin特色產品線：
WB相關：ECL發(fā)光液、預染marker、預制膠；IHC相關：二抗試劑盒、組化筆；IP/CoIP試劑盒；激動劑/抑制劑；血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE；凋亡試劑盒；呼吸爆發(fā)試劑盒；ELISA試劑盒；重組蛋白；抗體: 二抗、標簽抗體、對照抗體；定制服務(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...
9
立即詢價
您提交后，專屬客服將第一時間為您服務