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小鼠促黃體生成素(LH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒實驗原理

閱讀:183          發(fā)布時間:2017-12-26
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小鼠促黃體生成素(LH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中小鼠促黃體生成素(LH)。用純化的小鼠促黃體生成素(LH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入促黃體生成素(LH),與  HRP 標記的促黃體生成素(LH)抗體    ,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在   HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促黃體生成素 (LH)呈正相關(guān)。用酶標儀在  450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠促黃體生成素(LH)濃度。
標本要
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因   NaN3抑制辣根過(HRP)活性。
計算以標準物的濃度為橫坐標, OD值為縱坐標,在坐標紙上,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與  OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),
小鼠促黃體生成素(LH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有析出,稀釋時可在浴中加溫助溶,洗滌時不影響。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本  OD值大于標準品孔*孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
小鼠促黃體生成素(LH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月

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