豬皮膚成纖維細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：RBL-2H3細胞，大鼠嗜堿性細胞白血病細胞 敗毒梭菌Closidium septicum 非洲綠猴腎細胞;Vero E6 ORM2 Others Human 人 ORM2 人細胞裂解液 Hep-2, 人喉癌細胞系 骨髓瘤,45.6.TG1.7細胞 Hs888Lu 兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 人原代脾臟微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基

豬皮膚成纖維細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基

產(chǎn)品介紹

豬皮膚成纖維細胞永生化細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持豬皮膚成纖維細胞永生化細胞最佳的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含豬皮膚成纖維細胞永生化細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于豬皮膚成纖維細胞永生化細胞的培養(yǎng)。

成纖維細胞培養(yǎng)體系          500 ml

產(chǎn)品主要成分

原代成纖維細胞基礎培養(yǎng)基                            440 ml

原代成纖維細胞培養(yǎng)添加劑                            5 ml

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

復蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃；

2) 準備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預熱；

3) 戴上護目鏡，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復蘇的細胞，盡快轉入 37℃恒溫水浴鍋中

復溫晃動凍存管以提高復溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中，混勻后，1000rpm 離心 5min；

5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細胞名稱、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后，轉入 T-25 細胞培養(yǎng)中，混勻后轉入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細胞傳代建議一傳二）

1) 當細胞匯合度達到 85%以上時，可進行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞，將重懸后的細胞轉入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀，然后轉入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉入液氮罐中保存。

小鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human brain naiuretic peptide / brain naiuretic peptide (BNP) ELISA Kit 人腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒

HumanEsogen-inducedproteinpS2ELISAKit 人雌激素誘導蛋白PS2試劑盒 96T/48T 進口分裝

guineapigIerferonγ,IFN-γ試劑盒豚鼠γ干擾素(IFN-γ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細胞β-半乳糖苷酶活性化學發(fā)光法定量試劑盒20次

MouseCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠線粒體解偶聯(lián)蛋白2(UCP2)試劑盒 ，英文名： UCP2 ELISA Kit

Pla vitamin D3 (VD3) ELISA Kit 植物3(VD3)試劑盒

MouseImmunoglobulinG,IgGELISAKit 小鼠免疫球蛋白G(IgG)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanALRELISAKit人肝再生增強因子

細胞HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定量PCR擴增試劑盒20次

ELISAKitVLA大鼠遲現(xiàn)抗原

小鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)試劑盒   96T/48T

小鼠血小板因子3(PF-3)試劑盒   96T/48T

小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)試劑盒   96T/48T

小鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)試劑盒   96T/48T

羰基還原酶1抗體

CD99抗體

TNFSF9重組大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (Fc 標簽) Protein

GHRP-2 Acetate peptide(Growth hormone-releasing peptides 2 1gGHRP-2 Acetate peptide(Growth hormone-releasing peptides 2) 醋酸促生長激素釋放肽2

FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 標簽), Biotinylated P屬

豬皮膚成纖維細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基酸激酶(PK)重組蛋白 Recombinant Pyruvate Kinase, Liver And RBC (PK)

CD59 Protein Human 重組人 CD59 蛋白

IL1R1重組小鼠 IL1R1 / CD121a 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CD200 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD200 蛋白

GCSH重組人 GCSH 蛋白 Protein

?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服、鞋套，戴口罩、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清、緩沖液等試劑應無菌、無污染，使用前需進行無菌檢測。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對細胞進行支原體、細菌、真菌等污染檢測。