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葡萄糖脫氫酶(GCDH)測試盒紫外分光光度法

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50管/48樣312元15 盒 可售
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更新時間:2025-03-03 14:38:33瀏覽次數(shù):504

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50管/48樣
貨號 GOY-SH272-B 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) 檢測方法 紫外分光光度法
產(chǎn)品類別 糖代謝系列 品牌 谷研
貨期 現(xiàn)貨    
葡萄糖脫氫酶(GCDH)測試盒紫外分光光度法的相關(guān)產(chǎn)品:NAD激酶(NADK)測試盒微量法土壤β木糖苷酶 (SβXYS)測試盒土壤脲酶(SUE)測試盒土壤無機(jī)磷(SPHOS)含量測試盒脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)測試盒線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)測試盒

詳細(xì)介紹

正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

商品屬性:

產(chǎn)品名稱

葡萄糖脫氫酶(GCDH)測試盒紫外分光光度法

規(guī)格

50管/48樣

檢測方法

紫外分光光度法

貨號

GOY-SH272-B

產(chǎn)品分類

糖代謝系列

用途

僅供科研實(shí)驗(yàn)


葡萄糖脫氫酶(GCDH)測試盒紫外分光光度法

測定意義:

GCDH(EC 1.1.1.47)催化D-葡萄糖和NAD(P)生成D-葡萄糖酸和NAD(P)H,大量存在于高等動物的肝臟和弱氧化醋桿菌中。在低聚果糖生產(chǎn)中使用GCDH,不僅能去除低聚果糖中的葡萄糖提高低聚果糖的含量,而且生成的葡萄糖酸與鈣離子結(jié)合生成的葡萄糖酸是一種理

想的補(bǔ)鈣制劑。因而,GCDH已成為制備高含量低聚果糖的理想用酶。

測定原理:

GCDH催化D-葡萄糖和NAD生成D-葡萄糖酸和NADH,在340nm下測定NADH上升速率,即可反映GCDH活性。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液一:液體 25mL×1 瓶,4℃保存。

提取液二:液體 25mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:粉劑×1 瓶,-20℃保存;

試劑二:液體 25mL×1 瓶,4℃保存;

試劑三:液體 14μL×1 支,4℃保存;

組織樣本的前處理:

①總 GAPDH 酶提?。航ㄗh稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取上清測定。

②胞漿和葉綠體 GAPDH 酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10的比例(建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一),冰浴勻漿后于 4℃,200g 離心 5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g 離心 10min,取上清用于測定胞漿 GAPDH 酶活性,取沉淀加 1mL 提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取上清測定葉綠體中 GAPDH 酶活性。

建議測定總 GAPDH 酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的GAPDH,則按照步驟②提取粗酶液。細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞的前處理先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

測定步驟:

1、 分光光度計預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 340nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 樣本測定

(1)工作液的配制:將試劑二全部倒入試劑一瓶中,充分溶解,37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)預(yù)熱 10 分鐘;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

(2)在試劑三中加入 500μL 蒸餾水,充分混勻待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

(3)在 1mL 石英比色皿中加入 30μL 樣本、20μL 試劑三和 950μL 工作液,混勻,加入最后一個試劑的同時開始計時,記錄 340nm 處 20s 時的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值

A2,計算 ΔA=A1-A2。

GAPDH 活性計算

(1)按樣本蛋白濃度計算

單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=1072×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算

單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=1072×ΔA÷W

(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算

單位的定義:每一萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 樣÷V 樣總) ÷T=2.144×ΔAV 反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.03 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500 萬。

生化檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)操作說明:

一、抗氧化系列生化檢測試劑盒

包括氧化酶(XO)活性分析、超氧陰離子清除能力分析、葡萄糖氧化酶活性(GOD)檢測、總抗氧化能力(TAC)檢測、植物原花青素(OPC)含量檢測、植物類黃酮含量檢測、植物總酚(TP)含量檢測試劑盒。

氧化酶(XO)活性分析試劑盒為例,提供了一種簡單易用的比色分析法,用于測定各種樣品中的XO活性,特點(diǎn)是測定血清,血漿,組織/細(xì)胞裂解物和其他生物體液中的氧化酶活性,以及廣泛的檢測范圍:15.6 -500 mU/mL。

二、氧化系列生化檢測試劑盒

包括過氧化氫酶 (CAT) 活性分析、過氧化氫(H2O2)檢測、脂質(zhì)過氧化(丙二醛) 分析、蛋白質(zhì)羰基含量檢測、超氧陰離子含量檢測等試劑盒。

蛋白質(zhì)羰基含量檢測試劑盒(比色法)為例,提供了一種簡單易用的比色法,用于分析不同生物樣品(細(xì)胞/組織裂解液,生物液體)中蛋白質(zhì)羰基含量。在370 nm處有特征吸收峰。

特點(diǎn)是:1.測定組織樣本、細(xì)胞、細(xì)菌、血清等中的蛋白質(zhì)羰基含量。2.樣本處理、實(shí)驗(yàn)步驟以及結(jié)果計算更加詳盡準(zhǔn)確精煉。3.保質(zhì)期長。


葡萄糖脫氫酶(GCDH)測試盒紫外分光光度法


三、抗逆系列生化檢測試劑盒

包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測、羥自由基清除能力分析、多酚氧化酶(PPO)活性檢測、過氧化物酶(POD)活性檢測等試劑盒。

超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測試劑盒為例,提供一種簡單易用的比色測定法,用于定量測定血清,血漿,組織/細(xì)胞裂解液和其它生物體液中的SOD酶活性。

特點(diǎn)是:1.測定血清,血漿,組織/細(xì)胞裂解物和其他生物體液中的SOD酶活性。2.通過WST-8法測定SOD活性,zui大抑制率可接近100%,不受一些常見干擾因素的干擾。3.廣泛的檢測范圍:3.13- 200U/mL。

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