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輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法

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    上海市

規(guī)格
50管/24樣330元15 盒 可售
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更新時間:2025-03-03 17:08:17瀏覽次數(shù):316

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50管/24樣
貨號 GOY-SH183-B 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研研究實驗 檢測方法 可見分光光度法
產(chǎn)品類別 輔酶Ⅱ系列 品牌 谷研
貨期 現(xiàn)貨    
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:流感病毒甲型H1N1 PCR檢測試劑盒流感嗜血桿菌B型PCR檢測試劑盒流行性出血熱漢坦病毒PCR檢測試劑盒流行性肋腺炎病毒PCR檢測試劑盒流行性腦膜炎雙球菌PCR檢測試劑盒流行性腮腺炎病毒PCR檢測試劑盒流行性乙型腦炎病毒PCR檢測試劑盒特定基因序列PCR檢測試劑盒輪狀病毒A組PCR檢測試劑盒輪狀病毒PCR檢測試劑盒驢特定基因序列PC

詳細介紹

輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法

輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法

本公司所有產(chǎn)品僅供科學實驗,不做其他科學實驗外的使用!
商品屬性:
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法

貨號

GOY-SH183-B

檢測方法

可見分光光度法

規(guī)格

50管/24樣

產(chǎn)品類別

輔酶Ⅱ系列


測定意義:

輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法

輔酶ⅡNADP(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,NADP+和NADPH含量測定可以計算NADP(NADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值,其變化與磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應(yīng)密切相關(guān)。NADPH/NADP+比值不僅是細胞氧化還原態(tài)的主要標志之一,而且在PPP途徑、生物合成和抗氧化代謝中具有重要調(diào)控作用。

測定原理

分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NADP+和NADPH。NADPH通過PMS的遞氫作用,使氧化型噻唑藍(MTT)還原為甲瓚,570nm下檢測吸光值,從而測定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原NADP+為NADPH,從而檢測NADP+含量。

所需的儀器和用品

可見分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液一:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。

提取液二:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:粉劑×1 瓶,-20℃保存;

試劑二:液體 20mL×1 瓶,4℃保存;

試劑三:液體 14uL×1 支,4℃保存;

組織樣本的前處

①總 GAPDH 酶提?。航ㄗh稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取上清測定。

②胞漿和葉綠體 GAPDH 酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10的比例(建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一),冰浴勻漿后于 4℃,200g 離心 5min,棄沉淀,取上清4℃,8000g 離心 10min,取上清用于測定胞漿 GAPDH 酶活性,取沉淀加 1mL 提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取清測定葉綠體中 GAPDH 酶活性。建議測定總 GAPDH 酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的GAPDH,則按照步驟②提取粗酶液。細菌或培養(yǎng)細胞的前處理先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):提取液一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法

測定步驟:
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法

1、 分光光度計或酶標儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 340nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 樣本測定

(1)工作液的配制:將試劑二全部倒入試劑一瓶中,充分溶解,37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)預(yù)熱 10 分鐘;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

(2)在試劑三中加入 500μL 蒸餾水,充分混勻待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

(3)在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 5μL 樣本、5μL 試劑三和 190μL 工作液,混勻,加入最后一個試劑的同時開始計時,記錄 340nm 處 20s 時的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值 A2,計算 ΔA=A1-A2。

GAPDH 活性計算

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

(1)按樣本蛋白濃度計算

單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=1286×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算

單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=1286×ΔA÷W

(3)按細菌或細胞密度計算

單位的定義:每一萬個細菌或細胞每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 樣÷V 樣總) ÷T=2.572×ΔA

V 反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.005 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細菌或細胞總數(shù),500 萬。

b.用 96 孔板測定的計算公式如下

(1)按樣本蛋白濃度計算

單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=2572×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算

單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=2572×ΔA÷W

(3)按細菌或細胞密度計算

單位的定義:每一萬個細菌或細胞每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 樣÷V 樣總) ÷T=5.144×ΔA

V 反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103L / mol /cm;d:96 孔板光徑,0.5cm;V 樣:加入樣本體積,0.005 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細菌或細胞總數(shù),500 萬。

生化試劑盒的使用注意事項:
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法

選擇合適的試劑盒:根據(jù)實驗?zāi)康暮蜋z測對象選擇合適的試劑盒,確保實驗的準確性和可靠性。

嚴格遵循說明書:按照試劑盒的說明書進行操作,避免誤用或浪費。

注意保存條件:按照試劑盒的保存條件進行妥善保存,避免陽光直射、高溫或潮濕等不利因素。

控制實驗條件:在實驗過程中嚴格控制實驗條件,如溫度、時間、pH值等,以確保實驗結(jié)果的穩(wěn)定性。

公司正在出售的產(chǎn)品:
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法

丙二醛(MDA)測試盒微量法

超氧化物歧化酶(SOD)測試盒(WST8法)微量法

丙酮酸激酶(PK)測試盒紫外分光光度法

超氧陰離子測試盒微量法

查爾酮異構(gòu)酶(CHI)測試盒可見分光光度法

超氧陰離子測試盒可見分光光度法

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超氧陰離子清除能力測試盒可見分光光度法

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丙酮酸脫氫酶(PDH)測試盒可見分光光度法

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查爾酮異構(gòu)酶(CHI)測試盒微量法

人腫廇蛋白P63ELISA試劑盒

訂購流程:
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法

1、訂購前,請與銷售員核對產(chǎn)品中文名稱/CAS號/英文名稱等。

2、我司大部分產(chǎn)品都是現(xiàn)貨,產(chǎn)品核實好下單后即可當天發(fā)貨。(庫存信息以當日為準)如有特殊要求請在發(fā)貨前與銷售員聯(lián)系。

3、我司產(chǎn)品支持款到發(fā)貨、快遞代收尾款、網(wǎng)上現(xiàn)拍等付款方式。

4、質(zhì)量保證,嚴格把關(guān),如有產(chǎn)品異議經(jīng)公司鑒定確認后可包換包退,免除客戶后顧之憂。

5、我司提供完善的售后服務(wù),使用過程中如有任何疑問,可提供技術(shù)指導(dǎo)。


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