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α半乳糖苷酶(αGAL)測試盒可見分光光度法

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    上海市

規(guī)格
50管/24樣360元15 盒 可售
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更新時間:2025-03-03 20:26:38瀏覽次數:358

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產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50管/24樣
貨號 GOY-SH128-B 應用領域 生物產業(yè)
主要用途 僅供科研研究實驗 檢測方法 可見分光光度法
產品類別 糖代謝系列 品牌 谷研
貨期 現(xiàn)貨    
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詳細介紹

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定

商品屬性:

產品名稱

α半乳糖苷酶(αGAL)測試盒可見分光光度法

規(guī)格

50管/24樣

檢測方法

可見分光光度法

貨號

GOY-SH128-B

產品分類

糖代謝系列

用途

僅供科研實驗


α半乳糖苷酶(αGAL)測試盒可見分光光度法

測定意義:

α-GAL (EC 3.2.1.22)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,能專一地催化α半乳糖苷鍵的水解,主要參與棉子糖、水蘇糖、蜜二糖和半乳甘露聚糖等半乳糖苷的降解。α-GAL對于植物種子的萌發(fā)至關重要,種子萌發(fā)初期,其催化產生的D-半乳糖通過糖酵解途徑迅速轉化和消耗,為種子的萌發(fā)提供最初的能量來源,后期則主要參與細胞壁儲藏多糖水解。

測定原理

α-GAL分解對-硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷生成對-硝基苯,后者在400nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算α-GAL活性。

自備用品

可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液一:液體 25mL×1 瓶,4℃保存。

提取液二:液體 25mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:粉劑×1 瓶,-20℃保存;

試劑二:液體 25mL×1 瓶,4℃保存;

試劑三:液體 14μL×1 支,4℃保存;

組織樣本的前處理:

①總 GAPDH 酶提取:建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取上清測定。

②胞漿和葉綠體 GAPDH 酶的分離:按照植物組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10的比例(建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一),冰浴勻漿后于 4℃,200g 離心 5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g 離心 10min,取上清用于測定胞漿 GAPDH 酶活性,取沉淀加 1mL 提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取上清測定葉綠體中 GAPDH 酶活性。

建議測定總 GAPDH 酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的GAPDH,則按照步驟②提取粗酶液。細菌或培養(yǎng)細胞的前處理先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

測定步驟:

1、 分光光度計預熱 30min 以上,調節(jié)波長至 340nm,蒸餾水調零。

2、 樣本測定

(1)工作液的配制:將試劑二全部倒入試劑一瓶中,充分溶解,37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)預熱 10 分鐘;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

(2)在試劑三中加入 500μL 蒸餾水,充分混勻待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

(3)在 1mL 石英比色皿中加入 30μL 樣本、20μL 試劑三和 950μL 工作液,混勻,加入最后一個試劑的同時開始計時,記錄 340nm 處 20s 時的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值

A2,計算 ΔA=A1-A2。

GAPDH 活性計算

(1)按樣本蛋白濃度計算

單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=1072×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算

單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=1072×ΔA÷W

(3)按細菌或細胞密度計算

單位的定義:每一萬個細菌或細胞每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 樣÷V 樣總) ÷T=2.144×ΔAV 反總:反應體系總體積,1×10-3L;ε:NADH 摩爾消光系數,6.22×103L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.03 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;500:細菌或細胞總數,500 萬。

生化檢測試劑盒實驗操作說明:

一、抗氧化系列生化檢測試劑盒

包括氧化酶(XO)活性分析、超氧陰離子清除能力分析、葡萄糖氧化酶活性(GOD)檢測、總抗氧化能力(TAC)檢測、植物原花青素(OPC)含量檢測、植物類黃酮含量檢測、植物總酚(TP)含量檢測試劑盒。

氧化酶(XO)活性分析試劑盒為例,提供了一種簡單易用的比色分析法,用于測定各種樣品中的XO活性,特點是測定血清,血漿,組織/細胞裂解物和其他生物體液中的氧化酶活性,以及廣泛的檢測范圍:15.6 -500 mU/mL。

二、氧化系列生化檢測試劑盒

包括過氧化氫酶 (CAT) 活性分析、過氧化氫(H2O2)檢測、脂質過氧化(丙二醛) 分析、蛋白質羰基含量檢測、超氧陰離子含量檢測等試劑盒。

蛋白質羰基含量檢測試劑盒(比色法)為例,提供了一種簡單易用的比色法,用于分析不同生物樣品(細胞/組織裂解液,生物液體)中蛋白質羰基含量。在370 nm處有特征吸收峰。

特點是:1.測定組織樣本、細胞、細菌、血清等中的蛋白質羰基含量。2.樣本處理、實驗步驟以及結果計算更加詳盡準確精煉。3.保質期長。


α半乳糖苷酶(αGAL)測試盒可見分光光度法


三、抗逆系列生化檢測試劑盒

包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測、羥自由基清除能力分析、多酚氧化酶(PPO)活性檢測、過氧化物酶(POD)活性檢測等試劑盒。

超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測試劑盒為例,提供一種簡單易用的比色測定法,用于定量測定血清,血漿,組織/細胞裂解液和其它生物體液中的SOD酶活性。

特點是:1.測定血清,血漿,組織/細胞裂解物和其他生物體液中的SOD酶活性。2.通過WST-8法測定SOD活性,zui大抑制率可接近100%,不受一些常見干擾因素的干擾。3.廣泛的檢測范圍:3.13- 200U/mL。

公司正在出售的產品:

植物原花青素(OPC)測試盒

肉桂醇脫氫酶(CAD)測試盒微量法

葡萄糖脫氫酶(GCDH)測試盒紫外分光光度法

肉桂醇脫氫酶(CAD)測試盒紫外分光光度法

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肉桂酸4羥化酶(C4H)測試盒微量法

肉毒堿棕櫚酰轉移酶(CPT1)測試盒可見分光光度法

肉桂酸4羥化酶(C4H)測試盒紫外分光光度法

葡萄糖氧化酶(GOD)測試盒微量法

乳酸含量(LA)測試盒微量法

葡萄糖氧化酶(GOD)測試盒可見分光光度法

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漆酶測試盒微量法

人卵清蛋白特異性IgEELISA試劑盒

漆酶測試盒可見分光光度法

人錳超氧化物歧化ELISA試劑盒

葡萄糖脫氫酶(GCDH)測試盒紫外分光光度法

人免疫白AELISA試劑盒

葡萄糖氧化酶(GOD)測試盒微量法

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葡萄糖氧化酶(GOD)測試盒可見分光光度法

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漆酶測試盒微量法

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漆酶測試盒可見分光光度法

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