DAOY 細胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：CL-0385MFC-GFP(小鼠前胃癌細胞(綠色熒光蛋白標記)) THP 1細胞，單核細胞型淋巴瘤細胞 人前列腺癌細胞高轉(zhuǎn)移亞系,PC-3M 2B4細胞 人結(jié)膜成纖維細胞總RNAHConF NA HuT78細胞，T淋巴細胞白血病細胞 惡性黑色素瘤, 小鼠原代胎盤間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基 兔原代主動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基

?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服、鞋套，戴口罩、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清、緩沖液等試劑應無菌、無污染，使用前需進行無菌檢測。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對細胞進行支原體、細菌、真菌等污染檢測。

DAOY 細胞專用培養(yǎng)基

產(chǎn)品介紹

DAOY 細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持DAOY細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含 DAOY 細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于DAOY 細胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

MEM 基礎培養(yǎng)基                                445 mL

特級胎牛血清                                 50 mL

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

復蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃；

2) 準備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預熱；

3) 戴上護目鏡，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復蘇的細胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復溫晃動凍存管以提高復溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中，混勻后，1000rpm 離心 5min；

5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細胞名稱、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細胞傳代建議一傳二）

1) 當細胞匯合度達到 85%以上時，可進行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞，將重懸后的細胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

小鼠絨毛膜β(β-CG)ELISA pcr檢測試劑盒

Human brain g peptide (BGP/Gehrelin) ELISA Kit 人腦腸肽(BGP/Gehrelin)試劑盒

Humanvionectin,VELISAKit 人玻連蛋白/體外粘連蛋白(VN/CD51+CD61)pcr檢測試劑盒分裝

guineapigImmunoglobulinA,IgA試劑盒豚鼠免疫球蛋白A(IgA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細胞β-半乳糖苷酶活性比色法定量試劑盒20次

Mousecardioophln1,CT-1ELISAKit小鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸氧化酶4(NOX4)試劑盒 ，英文名： NOX4 ELISA Kit

Mouse thrombopoietin (TPO) ELISA Kit 小鼠血小板生成素(TPO)試劑盒

RatcoagulationfactorⅩ,FⅩELISAKit 大鼠Ⅹ(FⅩ)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforGM1(Humanai-gangliosideaibody)ELISAKit人抗抗體

細胞二脂酰甘油(DAG)含量酶連續(xù)循環(huán)反應比色法定量試劑盒20次

RatSubstanceP,SPELISAKit大鼠P物質(zhì)(SP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠型纖溶酶原激活物受體   英文名稱：   urokinase-plasmingen activator receptor   英文縮寫：   uPA-R

小鼠超敏感度促甲狀腺素   英文名稱：   Mouse ulasensitive Thyroid Stimulating Hormone   英文縮寫：   U.TSH

線粒體解偶聯(lián)蛋白2   英文名稱：   Mouse Mitochondrial Uncoupling Protein 2   英文縮寫：   UCP2

小鼠血管細胞粘附分子-1   英文名稱：   vascuiar endothelial cells adhesion molecule 1   英文縮寫：   VCAM-1

FAM160B1蛋白抗體

過氧化氫異構(gòu)酶ALOXE3抗體

CD200重組人 CD200 / OX-2 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

粒細胞集落刺激因子(GCSF)重組蛋白 Recombinant Colony Stimulating Factor 3, Granulocyte (GCSF)

PSMA3重組人 PSMA3 / Proteasome 20S alpha 3 蛋白 Protein

CPB2 Protein Human 重組人 Carboxypeptidase B2 / CPB2 蛋白

NP Protein H3N2 重組甲型流感 H

DAOY 細胞專用培養(yǎng)基粒細胞集落刺激因子(GCSF)重組蛋白 Recombinant Colony Stimulating Factor 3, Granulocyte (GCSF)

CPB2 Protein Human 重組人 Carboxypeptidase B2 / CPB2 蛋白

CD200重組人 CD200 / OX-2 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

NP Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP)

PSMA3重組人 PSMA3 / Proteasome 20S alpha 3 蛋白 Protein