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RPMI-1640 培養(yǎng)基

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更新時間:2025-03-19 14:38:32瀏覽次數(shù):175

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500ml
貨號 GOY-XP3091 應用領域 化工
主要用途 僅供科研研究實驗    
RPMI-1640 培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品:胞J.gamma1(STR鑒定正確)昆蟲RNA柱式提取試劑盒人結腸腺癌細胞LS1034 (STR鑒定正確)糞便RNA柱式提取試劑盒人鼻咽癌細胞C666-1(STR鑒定正確)動物RNA提取試劑盒(柱式Trizol)小鼠乳腺癌細胞 EMT-6(種屬鑒定)液體樣品RNA提取試劑盒人食管鱗癌細胞Kyse520 (STR鑒定正確)動物RNA提取

詳細介紹

RPMI-1640 培養(yǎng)基

RPMI-1640 培養(yǎng)基

英文名稱
RPMI-1640
規(guī)格500ml
貨號GOY-XP3091






RPMI 1640培養(yǎng)液是由Moor等研究成功的,最初為培養(yǎng)小鼠白血病細胞的需要而準備。開始的配方特別適合懸浮細胞的生長,主要針對淋巴細胞,后經(jīng)多次改良從RPMI 1630、1634,而至RPMI 1640。其組成較為簡單,但可以適應很多種類細胞的生長。不僅腫瘤細胞,而且很多正常組織細胞可用RMPI 1640進行體外培養(yǎng)。實驗室一般將RPMI 1640作為實驗和細胞維持的基本培養(yǎng)液,目前RPMI 1640是應用最為廣泛的培養(yǎng)基之一。

應用:

1、用于人類白血病細胞懸浮液單層細胞培養(yǎng)。

2、用于疫苗企業(yè)病毒株的傳代培養(yǎng)供后續(xù)抗原的制備。

3、用細胞培養(yǎng)基礎液。

4、用于動物疫病病毒采樣及病毒分離和維持液的基礎液。

注意事項

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部;這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,如有接觸,立即用自來水沖洗即可。

RPMI-1640 培養(yǎng)基

RPMI-1640 培養(yǎng)基


儀器試劑耗材
離心機胎牛血清(FBS)離心管(15ml、50ml)
生物安全柜無菌 1×PBS pH=7.2T-25 細胞培養(yǎng)瓶
電動移液器0.25%+0.02%EDTA一次性無菌移液管(2ml、5ml、10ml)
CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)基(含血清)1.8mL 凍存管
倒置顯微鏡凍存液:90%FBS+10%DMSO程序降溫盒




RPMI-1640 培養(yǎng)基

復蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃;

2) 準備一支 15ml 離心管,加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,放入 37℃水浴鍋中預熱;

3) 戴上護目鏡,厚毛線手套后,從液氮罐中取出要復蘇的細胞,盡快轉入 37℃恒溫水浴鍋中

復溫晃動凍存管以提高復溫速率;

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中,混勻后,1000rpm 離心 5min;

5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,寫上細胞名稱、日期,再加入 4ml 培養(yǎng)基;

6) 離心完成后棄去上清,用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后,轉入 T-25 細胞培養(yǎng)中,混勻后轉入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 (細胞傳代建議一傳二)

1) 當細胞匯合度達到 85%以上時,可進行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi),打開培養(yǎng)瓶瓶口,收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基;

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,水平放置培養(yǎng)瓶,使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,吸棄 PBS;

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min;

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起,若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,將懸液吸入 15ml 離心管;

① 準備一個無菌的 15ml 離心管,加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基;

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和(避免吹打③);向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,輕拍培養(yǎng)瓶,95%左右細胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min;

7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后,棄上清,用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞,將重懸后的細胞轉入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,每個培養(yǎng)瓶各 1ml;

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,震蕩混勻后,將培養(yǎng)瓶置于 37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

RPMI-1640 培養(yǎng)基

凍存 (細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支)

1)~6)參照傳代步驟

7)離心完成后,棄上清,用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀,然后轉入 1.8ml 凍存管中;

8)將凍存管轉入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,之后轉入-80℃冰箱中過夜降溫;

9)第二天,取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,盡快轉入液氮罐中保存。

RPMI-1640 培養(yǎng)基

人乳腺癌細胞帶紅色熒光MDA-MB-231+RFP(STR鑒定正確)RNase噴霧清除劑
人卵巢癌細胞熒光素酶標記 SKOV3+luc  (STR鑒定正確)表面RNase清除劑
人皮膚成纖維細胞Hs865.Sk(STR鑒定正確)RNA長效保存液
人Burkitt’s淋巴瘤細胞熒光素酶RAJI+LUC(STR鑒定正確)RNase抑制劑(小鼠源)
綿羊肺成纖維細胞OAR-L1(種屬鑒定)RNase抑制劑(人源)
B細胞淋巴瘤DOHH2(STR鑒定正確)Oligo(dT)纖維素
人胃癌細胞SNU-16(STR鑒定正確)一站式miRNA柱式提取試劑盒
人多發(fā)性骨髓瘤細胞ARD(STR鑒定正確)miRNA分離純化試劑盒(沉淀法)
大鼠少突膠質(zhì)前體細胞系OLN-93(種屬鑒定)柱式病毒RNA提取試劑盒
小鼠急性骨髓性白血病-綠色+熒光素酶標記C1498-GFP+LUC柱式病毒RNA-DNA共提試劑盒
人食管鱗癌細胞KYSE-140(STR鑒定正確)一管式病毒RNA提取試劑盒
犬腎細胞 MDCK-II(種屬鑒定)柱式細菌RNA提取試劑盒
人惡性黑色素瘤細胞SK-MEL-2 (STR鑒定正確)柱式分枝桿菌RNA提取試劑盒
人小細胞肺癌細胞NCI-H196(STR鑒定正確)細菌RNA提取試劑盒
人肺支氣管癌細胞NCI-H1666(STR鑒定正確)植物RNA柱式提取試劑盒2.0
小鼠膠質(zhì)瘤細胞GL261(種屬鑒定)植物RNA柱式提取試劑盒
人慢性B細胞白血病細胞MEC-1(STR鑒定正確)藻類RNA柱式提取試劑盒
人急性淋巴母細胞白血病細胞MT-4(STR鑒定正確)植物RNA提取專用高鹽溶液
小鼠肝癌細胞帶熒光素酶Hepa 1-6+LUC(種屬鑒定)血液RNA柱式提取試劑盒
人甲狀腺癌細胞KHM-5M(STR鑒定正確)血清血漿游離RNA提取試劑盒
小鼠單核巨噬細胞白血病細胞綠色熒光標記 RAW264.7+GFP(種屬鑒定)RPMI-1640 培養(yǎng)基軟體動物RNA柱式提取試劑盒
高轉移人肝癌細胞MHCC97-H(STR鑒定正確)軟骨RNA柱式提取試劑盒

RPMI-1640 培養(yǎng)基

?無菌操作?:細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行,使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服、鞋套,戴口罩、手套。

?器材滅菌?:玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?:所用培養(yǎng)液、血清、緩沖液等試劑應無菌、無污染,使用前需進行無菌檢測。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?:多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,偏差應控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應保持良好密封性,定期檢查氣體濃度與流量,細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應保持在95%左右。

?日常觀察?:每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?:定期對細胞進行支原體、細菌、真菌等污染檢測。


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