牛羊布病抗體快速檢測(cè)卡
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一.勻漿
1）從伍中提總RNA、
。.液氮研：結(jié)塊直入乳缽中，入少液氮，迅速研磨，待結(jié)變軟，加少液氮，再研，如此三次，如每五十腮100mg結(jié)入1ml Trizol，轉(zhuǎn)心管以下步行。
卜人.勻漿：以電動(dòng)勻漿器盡勻漿2min腮。。注意，結(jié)，積不能過(guò)Trizol積之10%，不會(huì)不好勻漿效。
二）自養(yǎng)細(xì)胞中提總RNA
。.粘壁養(yǎng)細(xì)胞：不須蛋白酶消化，先將養(yǎng)基去，然后直將Trizol預(yù)于養(yǎng)瓶中消、解坼細(xì)胞，Trizol積案10cm2 / ml之比例加。
卜人.懸浮養(yǎng)細(xì)胞：直心收細(xì)胞后以Trizol重懸、解坼，每1ml Trizol可解坼五×106一動(dòng)植之物或酵母細(xì)胞，或一人細(xì)菌細(xì)胞107×。注意，于入Trizol前不可以諸緩沖液滌細(xì)胞，則益mRNA降解之機(jī)。別，在解坼酵母或細(xì)菌細(xì)胞則假勻漿器。
二.相分離
1）勻漿結(jié)入Trizol后，室溫置5min，使其能解坼。意：此時(shí)可入真久存七十。。
室溫?。?，12000 min丫。，離心五min。取清于一新管。
三）按1ml Trizol入二百µllv枋，以手蕩混勻后室溫置二心三min。注意：禁漩振蕩器，以基因組DNA斷。
四四真。，12000 min丫。，離十五min。謹(jǐn)取上水于一新管。意：慎勿取中界面；若兼提DNA與蛋白質(zhì)，則保留重者相存于四真冰箱中，若但取RNA，則棄下者相。
三.RNA澄
1）按1ml Trizol入異丙醇。.五ml，混沌勻，室溫置五腮十min。
四真?。?，12000 min丫。，離15min。棄上清，RNA湛管底。意：RNA湛于離是非見之，常在離管之緣或底成凝膠狀丸。