發(fā)酵罐使用的時候怎么確定菌體生長狀況

發(fā)酵罐為研究小型發(fā)酵罐分批培養(yǎng)過程中大腸桿菌的菌體生長狀況，本實驗以分批培養(yǎng)法培養(yǎng)大腸桿菌，通過控制發(fā)酵過程的溫度、溶氧、攪拌速度、空氣流量、泡沫水平等參數(shù)，并每小時取樣測DO值和還原糖量，制作菌體生長曲線，以此判斷大腸桿菌的生長發(fā)酵狀況。本實驗選用生長迅速的大腸桿菌進行發(fā)酵罐的培養(yǎng)，同時定時地取樣測定，包括對菌體進行鏡檢、測定不同時期發(fā)酵液的細菌濁度以及殘留還原糖的變化發(fā)酵過程中，微生物的生長呈一定規(guī)律，掌握微生物生長曲線，可以防止菌種老化衰退、防止有害產(chǎn)物積累、提高發(fā)酵的效率，對生產(chǎn)有指導意義。通過測定生化指標，可大體了解菌體生長曲線，并在此基礎上采取適當措施促進微生物生長。生長曲線中，微生物產(chǎn)生代謝產(chǎn)物或抗生素多在對數(shù)期末期或穩(wěn)定期，因此可采取方法延長次期，如通過發(fā)酵罐等方法，不斷調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值，去除有害物質(zhì)，增加適量的氣體和營養(yǎng)物質(zhì)，使微生物延遲進入或不進入衰退期，從而生產(chǎn)出大量的有用的代謝產(chǎn)物。發(fā)酵罐是生化、食品、醫(yī)藥、農(nóng)藥、化工等生產(chǎn)領域的常用設備，雖然發(fā)酵罐的類型很多,如自吸式、氣升式等。但發(fā)酵工廠用得多的還是傳統(tǒng)的通用發(fā)酵罐(機械攪拌發(fā)酵罐)[2]。發(fā)酵罐配備控制系統(tǒng)，它主要是對發(fā)酵過程中的各種參數(shù)如溫度、pH、溶解氧、攪拌速度、空氣流量、補料、泡沫水平等進行設定、顯示、記錄以及對這些參數(shù)進行反饋調(diào)節(jié)控制配制培養(yǎng)基 1) 配制種子固體培養(yǎng)基100mL，分裝試管，0.1MPa滅菌20min，然后擺成斜面。 2) 配制種子培養(yǎng)液600mL，分裝50mL于一個250mL三角瓶中（作一級種子瓶），余下550mL平均分裝于三個500mL三角瓶中（作二級種子用），同上滅菌。 1.2.2接種與培養(yǎng) 

1) 上罐前兩天，從冰箱中取出菌種轉(zhuǎn)接斜面，37℃培養(yǎng)24h。 2) 上罐前一天，由斜面菌種轉(zhuǎn)接一級種子瓶， 37℃振蕩培養(yǎng)12h，然后轉(zhuǎn)接二級種子瓶， 37℃振蕩培養(yǎng)10h。 1.3上罐前的準備及實罐滅菌 1) 洗凈發(fā)酵罐及各聯(lián)接膠管 2) 配制發(fā)酵培養(yǎng)基5.0L，置發(fā)酵罐內(nèi)，加入幾滴泡敵。  3) 校正pH電極和溶氧（DO）電極。  ) 把電極插口、取樣管、補料口、消泡劑料瓶等固定、密封好后，開夾套出、進水閥V2、W1，發(fā)酵罐使夾套充滿水，用保護罩蓋住罐蓋及發(fā)酵罐，用傾倒螺釘鎖緊法蘭，開保護罩頂部排氣閥V4，啟動蒸氣發(fā)生器，啟動攪拌馬達，調(diào)轉(zhuǎn)速300r/min，開啟冷凝水出水閥V1，開啟蒸氣閥門S1，進行在位滅菌。  5) 當保護罩頂部閥門V4有蒸氣排出時，2min后關閉閥門，當罐溫接近滅菌溫度時，微開閥V4適當排氣，并調(diào)整蒸氣閥S1維持罐溫。保溫結(jié)束后，關蒸氣閥S1，全開冷凝水出水閥V1，開進水閥W3，發(fā)酵罐將溫度設定在37℃，切入自動。 6) 當溫度降到100℃以下，緩緩開排氣閥V4，使保護罩頂壓力表指示為零，移去保護罩。  7) 連接通氣管路，將進氣過濾器K7口與控制臺左側(cè)空氣出口連通，開彈簧夾，接通空氣壓縮機電源，對發(fā)酵罐進行通氣，調(diào)整空氣流量3～5L/min。  8) 當溫度達到37℃時，將預先滅菌的pH電極、DO電極（75%酒精消毒、UV消毒）接入發(fā)酵罐，連接各電極導線。