氧化應(yīng)激被定義為由于抗氧化劑和氧化劑之間的失衡，導(dǎo)致活性氧（ROS）產(chǎn)生增加。高級(jí)氧化蛋白產(chǎn)物（AOPP）是在氧化應(yīng)激期間通過(guò)氯化氧化劑（如氯胺和次氯酸）與血漿蛋白的反應(yīng)而產(chǎn)生的尿毒癥毒素。AOPP在結(jié)構(gòu)上與晚期糖基化終末產(chǎn)物（AGE）蛋白相似，并表現(xiàn)出類(lèi)似的生物活性。AOPP在患有腎臟并發(fā)癥、動(dòng)脈粥樣硬化、糖尿病、系統(tǒng)性硬化癥以及HIV陽(yáng)性的患者中水平升高。用次氯酸（HOCl）處理的人血清白蛋白（HSA）和體內(nèi)產(chǎn)生的AOPP可以分別在中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞中引發(fā)氧化反應(yīng)，這表明兩者都可以作為炎癥的真實(shí)介質(zhì)。盡管AOPP的降解和從血液中清除的機(jī)制尚未w全闡明，但似乎肝臟和脾臟主要負(fù)責(zé)它們的分離和清除。

AOPP檢測(cè)為許多與尿毒癥相關(guān)疾病狀態(tài)中的自由基活性以及許多化合物的抗氧化特性測(cè)量提供了相關(guān)信息。研究人員已經(jīng)修改了這種快速且簡(jiǎn)單的協(xié)議，用于評(píng)估血漿和組織樣本。AOPP-HSA濃度是通過(guò)氯胺當(dāng)量標(biāo)準(zhǔn)確定的。

艾美捷OxiSelect AOPP檢測(cè)試劑盒（#STA-318）提供了一種簡(jiǎn)單、可重復(fù)且一致的系統(tǒng)，用于檢測(cè)血漿、裂解液和組織勻漿中的高級(jí)氧化蛋白產(chǎn)物。該試劑盒包括一個(gè)氯胺標(biāo)準(zhǔn)品和一個(gè)AOPP人血清白蛋白（HSA）綴合物，用作陽(yáng)性對(duì)照。每個(gè)試劑盒提供足夠的試劑，可進(jìn)行200次檢測(cè)，包括標(biāo)準(zhǔn)曲線和未知樣本。

檢測(cè)原理：

高級(jí)氧化蛋白產(chǎn)物（AOPP）檢測(cè)試劑盒是一種生物檢測(cè)工具，用于直接定量測(cè)量生物樣本中的AOPP。未知的含AOPP樣本或氯胺標(biāo)準(zhǔn)品首先與檢測(cè)反應(yīng)啟動(dòng)劑混合，開(kāi)始顏色發(fā)育過(guò)程。經(jīng)過(guò)短暫孵育后，加入終止液，樣本和標(biāo)準(zhǔn)品可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)比色平板讀數(shù)器讀取。通過(guò)與預(yù)先確定的氯胺標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，確定未知樣本中的AOPP含量。

OxiSelect AOPP檢測(cè)試劑盒組分：

盒子1（室溫運(yùn)輸）

1. 氯胺標(biāo)準(zhǔn)品（部件編號(hào)231801）：1支20 µL試管，100 mM氯胺。

2. 氯胺反應(yīng)啟動(dòng)劑（部件編號(hào)231802）：1瓶1.0 g粉末。

3. 終止液（部件編號(hào)231803）：1瓶5 mL。

4. 10X檢測(cè)稀釋液（部件編號(hào)231804）：1瓶20 mL。w

盒子2（藍(lán)色冰袋運(yùn)輸）

1. AOPP-HSA陽(yáng)性對(duì)照（部件編號(hào)231805）：1支100 µL試管，7.5 mg/mL AOPP-人血清白蛋白，蛋白質(zhì)中AOPP含量為0.14 µmol/mg。

未提供材料：

1. 蛋白質(zhì)樣本，如純化蛋白、血漿、血清、細(xì)胞裂解液

2. 96孔微量滴定板

3. 1X PBS

儲(chǔ)存：

收到后，將AOPP-HSA陽(yáng)性對(duì)照儲(chǔ)存于-20oC。將所有其他組分儲(chǔ)存于4oC。

結(jié)果示例：

以下圖表展示了氯胺標(biāo)準(zhǔn)曲線和AOPP-HSA陽(yáng)性對(duì)照的典型AOPP檢測(cè)結(jié)果。以下數(shù)據(jù)僅供參考，不應(yīng)用于解釋實(shí)際結(jié)果。

圖1. AOPP檢測(cè)的氯胺標(biāo)準(zhǔn)曲線。氯胺標(biāo)準(zhǔn)曲線是按照檢測(cè)協(xié)議描述創(chuàng)建的。

圖2. AOPP-HSA陽(yáng)性對(duì)照和未處理的HSA均以100 µM濃度制備，并按照檢測(cè)協(xié)議用STA-318進(jìn)行檢測(cè)。

相關(guān)產(chǎn)品：

1. STA-305：OxiSelect™ 硝酪氨酸ELISA試劑盒

2. STA-308：OxiSelect™ 蛋白質(zhì)羰基免疫印跡試劑盒

3. STA-310：OxiSelect™ 蛋白質(zhì)羰基ELISA試劑盒

4. STA-816：OxiSelect™ N-ε-(羧甲基)賴氨酸（CML）競(jìng)爭(zhēng)性ELISA試劑盒

5. STA-817：OxiSelect™ 晚期糖基化終末產(chǎn)物（AGE）競(jìng)爭(zhēng)性ELISA試劑盒

OxiSelect AOPP檢測(cè)試劑盒引用文獻(xiàn)：

1. Deschamps-Latscha B. et al. (2005) Am. J. Kidney Dis. 45(1): 39-47.

2. Servettaz, A. et al. (2007) Ann. Rheum. Dis. 66: 1202-1209.

3. Witko-Sarsat, V. et al. (1996) Kidney International 49: 1304-1313.