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Vaspin ELISA, 96孔試劑盒

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產(chǎn)品型號

品       牌ALPCO

廠商性質(zhì)代理商

所  在  地武漢市

更新時間:2024-09-12 11:18:18瀏覽次數(shù):89次

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作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理,艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品Vaspin ELISA, 96孔試劑盒

用于定量測量Vaspin的酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)是基于通過遺傳免疫接種兔子(cDNA Vaspin SC306941)產(chǎn)生的多克隆兔抗血清。Vaspin,也稱為SerpinA12,是一種s氨酸蛋白酶抑制劑,由395個氨基酸組成,形成3個β-折疊和9個α-螺旋。Vaspin的分子量約為45.2 kDa。它不形成多聚體聚集體或分子內(nèi)二硫鍵,并且已知在人血清中沒有結(jié)合蛋白。Vaspin基因不僅在皮下和內(nèi)臟脂肪組織中表達,還在肝臟組織、胰腺1和人表皮(顆粒層角質(zhì)形成細胞/GK細胞)中表達?!把錠aspin水平在早餐前早晨最高,并且在早餐后2小時內(nèi)降至低水平。血清Vaspin水平在午餐和晚餐前也顯示出餐前上升和餐后下降,盡管程度小于早餐。餐間Vaspin濃度在下午中期達到低點,并在夜間上升,夜間Vaspin水平的峰值約為低點水平的250%。在長時間禁食后不規(guī)律進食顯著降低了血清Vaspin水平,這表明能量攝入本身對血清Vaspin水平有抑制作用。血清Vaspin濃度的晝夜模式與胰島素和葡萄糖的模式w全相反"。


作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理,艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品Vaspin ELISA, 96孔。產(chǎn)品僅用于科研,不可用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱貨號詳情

Vaspin ELISA, 96孔

ALP-22-VASHU-E01查看


方法

Vaspin的酶免疫測定是一種所謂的夾心測定法。它利用針對這種蛋白的特異性和高親和力的多克隆抗體。樣本中的Vaspin與微孔板上固定的第一抗體結(jié)合。隨后,生物s標記的抗體轉(zhuǎn)而與Vaspin結(jié)合。洗滌后,將添加鏈霉親和素-過氧化物酶-酶結(jié)合物,它將高度特異性地與生物s結(jié)合,并催化酶反應(yīng),根據(jù)樣本中Vaspin水平的多少,定量地改變底物的顏色。

樣本

血清樣本可用于此測定法。

樣本儲存

建議將樣本儲存在-20°C的緊閉塑料管中。

樣本準備

樣本必須用稀釋緩沖液(VP)稀釋。對于大多數(shù)測定(血清樣本,且不預(yù)期有j端值),使用1:4與稀釋緩沖液VP的稀釋比例應(yīng)該是合適的。根據(jù)預(yù)期的Vaspin水平,可以用VP進行更高或更低的稀釋。這個測試系統(tǒng)的z越線性允許樣本稀釋從1:2到1:32。人體來源的體液中的Vaspin濃度可能與血清或細胞培養(yǎng)上清w全不同。

稀釋建議方案:

在PE/PP管中移液210 ?l稀釋緩沖液VP(在大量系列中推薦使用多步移液器),加入70 ?l血清或血漿(稀釋1:4)?;旌虾螅看螠y定使用100 ?l此稀釋液。

技術(shù)建議

不能混合不同批號的試劑。如果儲存在2 – 8°C、未開封并避免陽光直射,所有試劑和微孔板都穩(wěn)定直至標示的有效期。如果適當使用,開封后組分的保質(zhì)期為4周。使用前將所有試劑置于室溫(20 - 25°C)。緩沖液中可能的沉淀在使用前必須通過混合和/或加熱溶解。室溫孵育意味著:20-25°C。


特異性:

通過兩種不同的方法研究了所用多克隆抗體的特異性。通過尺寸排除色譜法分離了原生血清樣本中的蛋白質(zhì),得到的分數(shù)進行了a) ELISA檢測,以及b) ELISA陽性的分數(shù)也通過西方印跡法進行了測試。圖2顯示ELISA在大約37 kDa處檢測到一個信號,這一點通過西方印跡法得到了確認。理論上,Vaspin的分子量為45.2 kDa。與重組Vaspin相比,SEC峰分數(shù)的信號大小相同。計算出的分子量的差異可能是由于柱子校準的可變性以及SEC條件的差異,如分數(shù)大小和流速造成的。

Vaspin ELISA, 96孔試劑盒

圖:Vaspin ELISA的特異性。將250?L人血清通過SEC Superdex 10/300GL進行分離,分數(shù)大小為0.5 ml,流速為0.5 ml/min。樣本用稀釋緩沖液稀釋至1:4。插圖顯示了西方印跡法的結(jié)果,樣本通過10% SDS-PAGE分離、轉(zhuǎn)移,并用生物s標記的抗體(1:1000)和鏈霉親和素-過氧化物酶結(jié)合物(1:1500)染色。


文獻參考:

1. Korner, A. et al. Vaspin is related to gender, puberty and deteriorating insulin sensitivity inchildren, Int J Obes 35, 578–586 (2011).

2. Toulza, E. et al. Large-scale identification of human genes implicated in epidermal barrierfunction, Genome Biol 8, R107 (2007).

3. Jeong, E. et al. Circadian Rhythm of Serum Vaspin in Healthy Male Volunteers: Relationto Meals, Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism 95, 1869–1875 (2010).

4. Loeffelholz, C. v. et al. Circulating vaspin is unrelated to insulin sensitivity in a cohort ofnondiabetic humans, European Journal of Endocrinology 162, 507–513 (2010).

5. Zhang, L. Li, L. Yang, M. Liu, H. & Yang, G. Elevated circulating vaspin levels weredecreased by rosiglitazone therapy in T2DM patients with poor glycemic control onmetformin alone, Cytokine (2011). 


ALPCO產(chǎn)品種類多樣,可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等,涉及神經(jīng)生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細胞因子與信號轉(zhuǎn)導、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領(lǐng)域,尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。


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Vaspin ELISA, 96孔試劑盒

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