谷氨酰胺酶是谷氨酰胺代謝中的關(guān)鍵酶。谷氨酰胺是癌細(xì)胞代謝中一種重要的氨基酸，谷氨酰胺分解的增加與癌癥的發(fā)生有關(guān)。BioAssay Systems的DGLN-100試劑盒提供了一種便捷的熒光法來(lái)測(cè)定生物樣本中的谷氨酰胺酶活性。在此檢測(cè)中，鄰苯二甲醛與釋放的氨反應(yīng)，熒光強(qiáng)度在λex/em = 415/475 nm處的增加與酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷(xiāo)產(chǎn)品谷氨酸酶測(cè)定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn)

- 快速安全。檢測(cè)可在50分鐘內(nèi)完成。非放射性檢測(cè)。

- 靈敏準(zhǔn)確。96孔板檢測(cè)的線性檢測(cè)范圍為0.66-500 U/L谷氨酰胺酶。

- 方便高效。均質(zhì)“混合-孵育-測(cè)量"型檢測(cè)?？奢p松自動(dòng)化，每天可檢測(cè)數(shù)千個(gè)樣本。

應(yīng)用

用于定量測(cè)定生物樣本中的谷氨酰胺酶活性。

試劑盒組成（96孔板，100次檢測(cè)）

- 檢測(cè)緩沖液：5 mL

- 20 mM標(biāo)準(zhǔn)品：50 uL

- 20 mM底物：500 uL

- 檢測(cè)試劑：5 mL

儲(chǔ)存條件

試劑盒在室溫下運(yùn)輸。收到后將所有組分儲(chǔ)存于-20°C。有效期：收到后6個(gè)月。

注意事項(xiàng)

- 試劑僅供研究使用。使用試劑時(shí)需遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)注意事項(xiàng)。詳細(xì)信息請(qǐng)參閱材料安全數(shù)據(jù)表。

操作步驟

本檢測(cè)基于動(dòng)力學(xué)反應(yīng)。為確保孵育時(shí)間一致，加入工作試劑（WR）時(shí)需迅速，混合需短暫但充分。建議使用多通道移液器。檢測(cè)可在室溫下進(jìn)行。

試劑準(zhǔn)備

- 檢測(cè)前將所有組分平衡至室溫，并在打開(kāi)前短暫離心試管。每次檢測(cè)需現(xiàn)配工作試劑（WR）。

酶準(zhǔn)備

- 酶應(yīng)在酶緩沖液中制備，例如20 mM磷酸鉀（pH 7.4）。以下協(xié)議針對(duì)枯草芽孢桿菌來(lái)源的谷氨酰胺酶進(jìn)行了優(yōu)化。如果使用其他酶，建議實(shí)驗(yàn)確定每孔所需的酶的最佳用量。

反應(yīng)準(zhǔn)備

1. 將每個(gè)樣本的10 uL分別加入到孔板的不同孔中。

2. 通過(guò)將每個(gè)孔的5 uL 20 mM底物和45 uL檢測(cè)緩沖液混合，準(zhǔn)備足夠的工作試劑（WR）用于所有樣本孔。

3. 通過(guò)向所有樣本孔中加入40 uL WR啟動(dòng)反應(yīng)。在室溫下孵育反應(yīng)30分鐘。

4. 向所有孔中加入50 uL檢測(cè)試劑。輕拍孔板以混合，孵育20分鐘后，在λex/em = 415/475 nm處測(cè)量熒光強(qiáng)度。

所需材料（但未提供）

移液裝置及配件（如多通道移液器）、黑色平底96孔板（如Corning Costar）、離心管和酶標(biāo)儀。

實(shí)驗(yàn)示例

在室溫下，使用2 mM谷氨酰胺作為底物，對(duì)不同濃度的谷氨酰胺酶進(jìn)行了30分鐘的檢測(cè)。

文獻(xiàn)：

1. Milano, S. K., et al (2022). New insights into the molecular mechanisms of glutaminase C inhibitors in cancer cells using serial room temperature crystallography. Journal of Biological Chemistry, 298(2),

101535.

2. Sugawara, K, Oyama, F. (1981). Fluorgenic reaction and specific microdetermination of ammonia. J. Biochem. 89, 771–774. 

BioAssay Systems是一家位于美國(guó)北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專(zhuān)注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷(xiāo)售高品質(zhì)的生化檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品種類(lèi)齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開(kāi)發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長(zhǎng)的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過(guò)50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開(kāi)發(fā)了超過(guò)250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測(cè)定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽(yáng)離子檢測(cè)。

作為BioAssay Systems在中國(guó)區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。

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