用于人血清中促甲狀腺激素（TSH）的定量測(cè)定。僅供研究使用。診斷程序中使用的注意事項(xiàng)。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品促甲狀腺激素（TSH）ELISA。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

促甲狀腺激素（TSH）ELISA檢測(cè)原理：

促甲狀腺激素（TSH）酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）基于固相酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定的原理。該測(cè)定系統(tǒng)利用一種d特的單克隆抗體，針對(duì)完整的TSH分子上的一個(gè)d特抗原決定簇。小鼠單克隆抗TSH抗體用于固相固定（在微孔板孔上）。山羊抗TSH抗體在抗體-酶（辣根過氧化物酶）結(jié)合溶液中。樣本被允許與兩種抗體同時(shí)反應(yīng)，導(dǎo)致TSH分子被夾在固相和酶聯(lián)抗體之間。在室溫下孵育60分鐘或過夜后，用水潤洗孔以去除未結(jié)合的標(biāo)記抗體。加入TMB溶液并孵育20分鐘，導(dǎo)致藍(lán)色出現(xiàn)。通過加入停止溶液（1N鹽酸），顏色發(fā)展停止，顏色變?yōu)辄S色。TSH的濃度與測(cè)試樣本的顏色強(qiáng)度成正比。在450納米處用分光光度計(jì)測(cè)量吸光度。

試劑材料

試劑盒提供的物料：

1. 抗體包被孔（1板，96孔）：用小鼠單克隆抗TSH抗體包被的微孔板。

2. 酶結(jié)合試劑（1瓶，13 mL）：含有與辣根過氧化物酶結(jié)合的山羊抗TSH抗體。

3. 參考標(biāo)準(zhǔn)組[標(biāo)準(zhǔn)1-6]（每級(jí)1瓶；共6瓶）：含有0, 0.5, 2, 5, 10和25 ?IU/mL（WHO, 第2次國際參考品，80/558）的TSH，溶于含防腐劑的馬血清中，凍干。

4. TMB試劑（1瓶，11 mL）：含有在緩沖溶液中穩(wěn)定的3,3',5,5'四甲基聯(lián)苯胺（TMB）。

5. 停止溶液（1N鹽酸），1瓶，11 mL 含有稀釋的鹽酸。

試劑盒未提供的物料：

1. 蒸餾水或去離子水

2. 精密移液管：50 ?L, 100 ?L, 200 ?L 和 1 mL

3. 一次性移液管頭

4. 漩渦混合器或同等設(shè)備

5. 能夠讀取450nm吸光度的微孔板讀取器

6. 吸水紙

7. 坐標(biāo)紙（半對(duì)數(shù)等）

8. 質(zhì)量控制材料（例如，BioRad Lyphochek對(duì)照血清）

9. 計(jì)時(shí)器

試劑盒的儲(chǔ)存

收到后未開封的試劑盒應(yīng)存放在2-8°C的環(huán)境中，并且在不使用時(shí)，直到試劑盒標(biāo)簽上顯示的有效期為止。參考包裝標(biāo)簽上的有效期。除凍干標(biāo)準(zhǔn)品外，開封并使用過的試劑，如果適當(dāng)儲(chǔ)存在2-8°C，直到有效期都是穩(wěn)定的。重懸的標(biāo)準(zhǔn)品在2-8°C密封儲(chǔ)存時(shí)，穩(wěn)定期長(zhǎng)達(dá)30天。將微孔板存放在帶有干燥劑的密封袋中，以減少潮濕空氣的接觸。

儀器

450納米波長(zhǎng)下帶寬為10納米或更小，光密度范圍為0-2 OD或更大的微孔板讀取器適用于吸光度測(cè)量。

樣本收集和準(zhǔn)備

應(yīng)從通過可接受技術(shù)獲得的全血樣本中制備血清。本試劑盒僅適用于無添加劑的血清樣本。避免使用明顯溶血、脂血或渾濁的樣本。樣本應(yīng)加蓋，并可在2-8°C下儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá)48小時(shí)，然后用于測(cè)定。需要更長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存的樣本應(yīng)僅在-20°C下冷凍一次，然后使用。解凍的樣本在測(cè)試前應(yīng)多次倒置。

標(biāo)準(zhǔn)曲線示例:

該測(cè)定的典型標(biāo)準(zhǔn)運(yùn)行結(jié)果如下所示。標(biāo)準(zhǔn)曲線僅用于說明，不應(yīng)用于計(jì)算未知值。標(biāo)準(zhǔn)曲線涵蓋了0至25?IU/mL的動(dòng)態(tài)范圍。由于在不同實(shí)驗(yàn)室的不同室溫下孵育，吸光度（450 nm）值可能會(huì)有所不同。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測(cè)樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長(zhǎng)。

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