腺病毒是一種無(wú)包膜病毒，其衣殼呈二十面體結(jié)構(gòu)，直徑為90到100納米，包含一個(gè)雙鏈DNA基因組，基因組大小在26到46 kb之間。重組腺病毒已被開發(fā)為基因傳遞載體，用于重組疫苗和基因治療應(yīng)用，包括代謝紊亂和癌癥的治療。

傳統(tǒng)上，感染性顆粒通過(guò)噬菌斑形成單位（PFU）測(cè)定法在培養(yǎng)中測(cè)量，該方法根據(jù)稀釋度計(jì)算病毒噬菌斑的數(shù)量。這些方法耗時(shí)（10-14天），需要較長(zhǎng)的感染期，并且存在高度的實(shí)驗(yàn)間變異性和受病毒-細(xì)胞相互作用的影響。Cell Biolabs的QuickTiter?免疫測(cè)定試劑盒利用針對(duì)腺病毒六鄰體蛋白的抗體，通過(guò)免疫細(xì)胞化學(xué)染色觀察感染細(xì)胞。六鄰體蛋白是腺病毒衣殼中最大且豐富的結(jié)構(gòu)蛋白，它們對(duì)稱分布以形成衣殼的面。

Cell Biolabs的QuickTiter?免疫測(cè)定試劑盒提供了一種快速且完整的系統(tǒng)，用于測(cè)定病毒的感染性滴度。該試劑盒提供的試劑足以在24孔板中進(jìn)行多達(dá)100次滴定。與經(jīng)典的噬菌斑測(cè)定法所需的10到14天感染期相比，該試劑盒僅需2天感染期。試劑盒中的六鄰體蛋白抗體通過(guò)免疫細(xì)胞化學(xué)識(shí)別所有51種腺病毒血清型，只要病毒能夠在A549或類似的易感細(xì)胞中擴(kuò)增，就可以與任何腺病毒系統(tǒng)配合使用。

作為Cell Biolabs全國(guó)總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Cell Biolabs熱銷產(chǎn)品QuickTiter 野生型腺病毒滴度免疫試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

檢測(cè)原理

1. 在24孔板中接種A549細(xì)胞  

↓  

2. 準(zhǔn)備腺病毒稀釋液并感染A549細(xì)胞48小時(shí)  

↓  

3. 使用抗腺病毒抗體進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC）染色  

↓  

4. 計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞并計(jì)算病毒滴度  

相關(guān)產(chǎn)品

1. VPK-252：RAPAd? CMV腺病毒表達(dá)系統(tǒng)  

2. VPK-099：ViraBind?腺病毒小柱純化試劑盒  

試劑盒組成（藍(lán)冰運(yùn)輸）

1. 抗腺病毒抗體（1000倍稀釋）（部件編號(hào)51681C）：一支30 ?L的管  

2. 二抗，HRP偶聯(lián)物（1000倍稀釋）（部件編號(hào)10902）：一支50 ?L的管  

3. DAB底物（25倍稀釋）（部件編號(hào)10903）：一支1.5 mL的管  

4. 稀釋液（10倍稀釋）（部件編號(hào)10905）：一瓶4.5 mL  

未提供材料

1. 感興趣的腺病毒  

2. A549細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)生長(zhǎng)培養(yǎng)基  

3. 甲醇  

4. 1% BSA/PBS  

5. H?O?  

6. 光學(xué)顯微鏡  

保存方法

收到后，請(qǐng)將試劑盒中的所有組分保存在4℃。

結(jié)果示例

以下圖表展示了典型的滴定結(jié)果。以下數(shù)據(jù)僅供參考，不應(yīng)用于解釋實(shí)際結(jié)果。

圖1：野生型Ad5滴定。** 使用純化的野生型Ad5進(jìn)行10倍系列稀釋后，感染24孔板中的A549細(xì)胞48小時(shí)。按照檢測(cè)協(xié)議進(jìn)行抗腺病毒免疫染色。

文獻(xiàn)參考：

1. Tatsis N, Ertl HC. (2004) Adenoviruses as vaccine vectors. Mol Ther. 10:616–629.

2. Vannucci L, Lai M, Chiuppesi F, Ceccherini-Nelli L, Pistello M. (2013) Viral vectors: A look back and ahead on gene transfer technology. New Microbiol. 36:1–22.

3. Mittal SK, Ahi YS, Vemula SV. (2016) Xenogenic adenoviral vectors. In: Curiel D,editor. Adenoviral Vectors for Gene Therapy. 2nd ed. San Diego,California: Academic Press; 495–528.

4. Vemula SV, Mittal SK. (2010) Production of adenovirus vectors and their use as a delivery system for influenza vaccines. Expert Opin Biol Ther. 10:1469–1487.

5. Sharma A, Tandon M, Bangari DS, Mittal SK. (2009) Adenoviral vector-based strategies for cancer therapy. Curr Drug Ther. 4:117–138.

6. Bangari DS, Mittal SK. (2006) Development of nonhuman adenoviruses as vaccine vectors. Vaccine. 24:849–862.

7. Bewig B., Schmidt WE (2000) Accelerated titering of adenoviruses. BioTechniques 28:870-873.

Cell Biolabs公司位于美國(guó)加利福尼亞州南部重要的工業(yè)城市圣迭戈（San Diego），是有名的細(xì)胞學(xué)試劑品牌，作為前沿的細(xì)胞學(xué)分析檢測(cè)試劑盒生產(chǎn)商，為生物技術(shù)和研究類客戶提供好的基于細(xì)胞功能研究以及疾病等方面的g端產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。產(chǎn)品主要涵蓋細(xì)胞研究、細(xì)胞信號(hào)通路和蛋白質(zhì)生物學(xué)、代謝研究、病原體和毒素、干細(xì)胞研究等領(lǐng)域。全球眾多大學(xué)、政府研究機(jī)構(gòu)、生物、制藥企業(yè)的科研實(shí)驗(yàn)室均在使用Cell Biolabs的產(chǎn)品。  

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