埃立克體PCR檢測試劑盒說明書
豬瘟病毒（Classical swine fever virus，CSFV；或稱 Hog cholera virus， HCV）是 ssRNA 病毒，屬黃病毒科瘟病毒屬，其 RNA 為單股正鏈。由 CSFV 引起的豬瘟病是一種急性、熱性、高度接觸性的傳染病，廣泛存在于*各養(yǎng) 豬國家，嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。因此，CSFV 的快速準(zhǔn)確鑒定，對該病的預(yù)防 和檢疫有著重要作用。

本公司開發(fā)了埃立克體PCR檢測試劑盒，采用 RT-PCR 技術(shù)檢測疑似 感染動物血清或組織中的 CSFV。

具有下列特點(diǎn)：

1. 用于 CSFV 的定性鑒定檢測和分子流行病學(xué)調(diào)查。

2. 能對樣品中 CSFV 進(jìn)行快速檢測，具有良好的特異性和敏感性。

3. 使用一管式 RT-PCR 試劑盒，減少了操作步驟，降低了操作誤差

規(guī)格及成分 成分 編號 50 次塑料袋包裝 雙酶一管式 RT-PCR Buffer，2× 91202A 750 μL MMLV-Taq Mix 91202B 100 μL CSFV 專一性引物對 yw11251126 100 μL CSFV 陽性對照 yw11271128 50 μL 超純水 100935 1 mL 使用手冊 1 份 運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限一年。 自備試劑 一管式病毒 RANout 或柱式病毒 RNAout
使用方法

一、樣品 RNA 的制備 用自選方法純化 CSFV 樣品的 RNA，也可以另購本公司的一管式病毒 RANout 或柱式病毒 RNAout，上述兩款產(chǎn)品跟本試劑盒兼容。

二、陽性對照 1. 為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對 照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。 2. 使用本陽性對照時，由于其濃度較高，一定要注意不要污染其他試劑和成分。 zui在專門的區(qū)域操作。
三、設(shè)置 RT-PCR 反應(yīng)（30 uL 體系） 3. 在 PCR 管中加入下列成分： 成 份 樣品 陽性對照 陰性對照 雙酶一管式 RT-PCR Buffer，2× 15 uL 15 uL 15 uL CSFV 專一性引物對 2 uL 2 uL 2 uL 樣品 RNA 1-5 uL 無 無 CSFV 陽性對照 無 2 uL 無 補(bǔ)超純水到 28 uL 28 uL 28 uL MMLV-Taq Mix 2 uL 2 uL 2 uL 4. 輕柔混勻后上機(jī)，按下面參數(shù)進(jìn)行 RT-PCR。
過程 溫度 時間 逆轉(zhuǎn)錄 60℃ 30 min 預(yù)變性 94℃ 2 min PCR 反應(yīng) （30 個循環(huán)） 94℃ 30 s 55℃ 30 s 72℃ 1 min 延伸 72℃ 5 min 5. 電泳檢測 RT-PCR 產(chǎn)物。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 267 bp。 關(guān)聯(lián)產(chǎn)品 非洲豬瘟病毒 PCR 檢測試劑盒（CAT#:11-230）
溫馨提示：不可用于臨床治療。