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鉤端螺旋體通用PCR檢測(cè)試劑盒

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更新時(shí)間:2023-03-15 21:45:42瀏覽次數(shù):220

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè) 主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)
英文名稱 Leptospiraspp.PCR    
鉤端螺旋體通用PCR檢測(cè)試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:七星庫道蟲PCR檢測(cè)試劑盒Kudoa septempunctataPCR七星庫道蟲探針法熒光定量PCR試劑盒Kudoa septempunctata氣單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒氣單胞菌通用PCR檢測(cè)試劑盒Aeromonas spp.PCR

詳細(xì)介紹

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產(chǎn)品特點(diǎn):

◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;

◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;

◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);

◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

服務(wù)流程:

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

規(guī)格

鉤端螺旋體通用PCR檢測(cè)試劑盒

Leptospira spp.PCR

50次

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實(shí)驗(yàn)過程:

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

二、操作步驟

1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1(10pM)               2μl

引物2(10PM)              2μl

Taq酶(2U/μl)            1μl

DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

ddH2O至               50 μl

PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。

2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。

3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。

4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

三、注意事項(xiàng)

1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。

2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。

3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。

4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。

5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。

6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。

7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer

5 μl     dNTP mix (2mM)

4 μl     引物1(10pM)

2 μl     引物2(10pM)

2 μl     Taq酶 (2U/μl)

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)

1 μl      加ddH2O至 50 μl

PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

公司正在出售的產(chǎn)品:

伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒Actinobacillus actinomycetemcomitans

豬胸膜肺炎放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒Actinobacillus pleuropneumoniae

馬杜拉放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒Actinomadura madurae

白樂杰馬杜拉放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒Actinomadura pelletieri

牛型放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒Actinomyces bovis

歐洲放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒Actinomyces europaeus

戈氏放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒Actinomyces gerencseriae

衣氏放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒Actinomyces israelii

內(nèi)氏放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒Actinomyces naeslundii

化膿放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒Actinomyces pyogenes
鉤端螺旋體通用PCR檢測(cè)試劑盒干擾suγ(IFNγ)ELISA試劑盒Rabbit Ierferon Gamma(IFNg)ELISA Kit

干擾suα(IFNα)ELISA試劑盒Rabbit Ierferon Alpha(IFNa)ELISA Kit

肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒Rabbit Hepatocyte Growth Factor(HGF)ELISA Kit

su輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA試劑盒Rabbit Heparin Cofactor II(HCII)ELISA Kit

 


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