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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50次 |
|---|---|---|---|
| 應用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) | 主要用途 | 僅供科研實驗 |
| 英文名稱 | SandflyFeverSicilianVirus(SFSV)RTPCR |
詳細介紹
產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
服務流程：
公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
白蛉熱西西里病毒PCR檢測試劑盒 | Sandfly Fever Sicilian Virus(SFSV)RTPCR | 50次 |
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實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個專用的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
公司正在出售的產(chǎn)品：
過氧化還原mei5(PRDX5)重組蛋白英文名稱：Recombina Peroxiredoxin 5 (PRDX5)物種：Homo sapiens (Human，人)
過氧化還原mei6(PRDX6)重組蛋白英文名稱：Recombina Peroxiredoxin 6 (PRDX6)物種：Homo sapiens (Human，人)
過氧化還原mei2(PRDX2)重組蛋白英文名稱：Recombina Peroxiredoxin 2 (PRDX2)物種：Homo sapiens (Human，人)
跨膜絲氨suan蛋白mei4(TMPRSS4)重組蛋白英文名稱：Recombina Transmembrane Protease, Serine 4 (TMPRSS4)物種：Homo sapiens (Human，人)
核苷suan還原meiM1(RRM1)重組蛋白英文名稱：Recombina Ribonucleotide Reductase M1 (RRM1)物種：Homo sapiens (Human，人)
原卟啉原氧化mei(PPOX)重組蛋白英文名稱：Recombina Protoporphyrinogen Oxidase (PPOX)物種：Homo sapiens (Human，人)
原卟啉原氧化mei(PPOX)重組蛋白英文名稱：Recombina Protoporphyrinogen Oxidase (PPOX)物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)
雙特異性磷suanmei5(DUSP5)重組蛋白英文名稱：Recombina Dual Specificity Phosphatase 5 (DUSP5)物種：Homo sapiens (Human，人)
雙特異性磷suanmei5(DUSP5)重組蛋白英文名稱：Recombina Dual Specificity Phosphatase 5 (DUSP5)物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)
雙特異性磷suanmei6(DUSP6)重組蛋白英文名稱：Recombina Dual Specificity Phosphatase 6 (DUSP6)物種：Homo sapiens (Human，人)
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倉鼠白介su3(IL-3)ELISA試劑盒Hamster Ierleukin 3,IL-3 ELISA Kit
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