化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
ELISA 試驗時，注意事項如下：
1. 正式試驗時，應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中，進(jìn)行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括:
（1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
（2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質(zhì)包被適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。
（3） 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定（見酶標(biāo)記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
（4） 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 。
詳細(xì)參考數(shù)值：
產(chǎn)品名稱：內(nèi)皮細(xì)胞特異性分子ELISA檢測試劑盒
英文名稱：Endocan;ESM-1
檢測范圍：1.25ng/mL~40ng/mL
貨號：YS-E97160
性狀：盒狀液體。
實驗方法：競爭法、一步法、夾心法、高敏法等。
作用范圍：科學(xué)研究。
樣品形式：血清血漿細(xì)胞培養(yǎng)上清其它生物液體
保質(zhì)期：6個月，本公司試劑盒系列產(chǎn)品均為**批次，請放心購買！
庫存信息： *√質(zhì)量保證√庫存充足√
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果，可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)！
注意事項：
1加樣：
①實驗樣本過多時，可分批次操作，以減少實驗時間延長造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗時，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件；
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板：
①手工洗板時，拍板時要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機(jī)洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實驗室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
優(yōu)點：
1、*抗體----高效、靈敏、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻，吸附性好，空白值低，孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高，可靠性強(qiáng)
4、購買本公司的ELISA試劑盒，免費代測
5、技術(shù)服務(wù)要求：專業(yè)，規(guī)范，高效
6、適用于體液、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測動物類型豐富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黃金地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等
8、可檢測指標(biāo)齊全：炎癥因子、血管生成素、動脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟(jì)、實惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實驗體系，科研隊伍，良好的實驗設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果，是您可靠的合作伙伴。
400U RNase抑制劑（人源） Human RNase Inhibitor -20℃保存
25mL TBE Sample Buffer,6X TBE Sample Buffer,6X 常溫保存
1000mL Semi Dry Blot Transfer Buffer Semi Dry Blot Transfer Buffer 常溫保存
50T 破傷風(fēng)芽孢梭菌PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
500 mL IMDM培養(yǎng)基（含1%雙抗） Cell Culture Medium -20℃保存
25次 mRNA提取試劑盒 mRNA Isolation Kit 4℃保存
200mL 自誘導(dǎo)培養(yǎng)基（lac啟動子） Auto-induction Medium 常溫
50次 沉淀法miRNA分離試劑盒 miRNA Isolation Kit 4℃保存
200 mL 人單核細(xì)胞分離液1.075 Cell Separation Solution -20℃保存
2 ug pUB6/V5 His B pUB6/V5 His B 低溫運輸，-20℃保存
1000U Taq DNA 連接酶（Taq DNA Ligase) Taq DNA Ligase -20℃保存
2 ug pGL4.26 pGL4.26 低溫運輸，-20℃保存
1瓶 7WML6.0細(xì)胞株 7WML6.0 低溫運輸和保存
內(nèi)皮細(xì)胞特異性分子ELISA檢測試劑盒100mL 濕潤劑 P-40 Nonidet P-40（NP-40） 室溫保存
2 ug pET-26b(+) pET-26b(+) 低溫運輸，-20℃保存
500mL PIPES Buffered Saline，5X,pH6.5 PIPES Buffered Saline，5X,pH6.5 常溫保存
2 ug pOTB7 STX1A pOTB7 STX1A 低溫運輸，-20℃保存
50T 副溶血性弧菌PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
50T 蝦PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
1mL LAMP可見光染料 LAMP Visible Dye -20℃保存
250mL Succinate Buffer（琥珀酸緩沖液）,0.2M,pH6.0 Succinate Buffer,0.2M,pH6.0 常溫保存
100mL HEPPS Buffer,0.2M,pH7.4 HEPPS Buffer,0.2M,pH7.4 常溫保存
25g 原釩酸鈉，十二水 Sodium Orthovanadate Dodecahydrate 室溫密封保存
2 ug pBD-p53 pBD-p53 低溫運輸，-20℃保存
125mL RNase-Free TE Buffer（無RNase的TE緩沖液），pH8.0 RNase-Free TE Buffer，pH8.0 常溫保存
2 ug pET-43.1b(+) pET-43.1b(+) 低溫運輸，-20℃保存
化工儀器網(wǎng)