化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50次 |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
| 英文名稱 | Schistosomaspp.PCR |
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；
◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
服務(wù)流程：
公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
血吸蟲(chóng)通用PCR檢測(cè)試劑盒 | Schistosoma spp.PCR | 50次 |
相關(guān)產(chǎn)品
傳染性造血器官壞死病病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)
傳染性皮下和造血器官壞死病病毒PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格
同禽皰疹病毒1型雞傳染性喉氣管炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒直銷(xiāo)
傳染性肌肉壞死病病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
傳染性胰臟壞死病病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
三、注意事項(xiàng)
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。
２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi)，并且要充分混勻。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
核受體相關(guān)蛋白1檢測(cè)試劑盒 NURR1 ELISA KitNuclear Receptor Related Protein 1(NURR1)ELISA Kit
核仁磷suan蛋白3檢測(cè)試劑盒 NPM3 ELISA KitNucleophosmin 3(NPM3)ELISA Kit
核仁磷suan蛋白2檢測(cè)試劑盒 NPM2 ELISA KitNucleophosmin 2(NPM2)ELISA Kit
核仁蛋白9檢測(cè)試劑盒 NOL9 ELISA KitNucleolar Protein 9(NOL9)ELISA Kit
核仁蛋白8檢測(cè)試劑盒 NOL8 ELISA KitNucleolar Protein 8(NOL8)ELISA Kit
核仁蛋白7檢測(cè)試劑盒 NOL7 ELISA KitNucleolar Protein 7(NOL7)ELISA Kit
核仁蛋白6檢測(cè)試劑盒 NOL6 ELISA KitNucleolar Protein 6(NOL6)ELISA Kit
核仁蛋白58檢測(cè)試劑盒 NOP58 ELISA KitNucleolar protein 58(NOP58)ELISA Kit
核仁蛋白4檢測(cè)試劑盒 NOL4 ELISA KitNucleolar Protein 4(NOL4)ELISA Kit
核仁蛋白3檢測(cè)試劑盒 NOL3 ELISA KitNucleolar Protein 3(NOL3)ELISA Kit
血吸蟲(chóng)通用PCR檢測(cè)試劑盒鴨環(huán)磷suan腺苷(cAMP)ELISA試劑盒Duck cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit
鴨環(huán)磷suan鳥(niǎo)苷(cGMP)ELISA試劑盒Duck cyclic guanosine monophosphate,cGMP ELISA Kit
鴨病毒性腸炎病毒(DEV)ELISA試劑盒Duck virus eeritis,DEV ELISA Kit
鴨白介su8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒Duck Ierleukin-8,IL-8 ELISA Kit
化工儀器網(wǎng)