大鼠背根神經(jīng)元原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代表皮角質(zhì)形成細(xì)胞 木瓜蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL 腦動脈血管平滑肌細(xì)胞 AsPC-1 人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞 HEC-1A, 人內(nèi)膜癌細(xì)胞系 Human 豬原代成骨細(xì)胞

大鼠背根神經(jīng)元原代細(xì)胞

大鼠背根神經(jīng)元細(xì)胞分離自脊椎背根神經(jīng)節(jié)；感覺神經(jīng)母細(xì)胞發(fā)出軸突，呈束狀，左右對稱地從神經(jīng)管的背部進入，此時的脊神經(jīng)節(jié)即改稱為背根神經(jīng)節(jié)。神經(jīng)系統(tǒng)最基本的結(jié)構(gòu)和功能單位是神經(jīng)元，即神經(jīng)細(xì)胞，其大小和外觀在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中差異很大。但都具有胞體和樹突、軸突。胞體又叫核周體，內(nèi)含神經(jīng)絲、微管、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、游離核糖體和一個有明顯核仁的核。一些大神經(jīng)元突起的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可用Nissl染色顯示，在光鏡下是灰藍(lán)色斑塊狀，稱為尼氏小體。樹突和軸突是神經(jīng)元的突起，能在神經(jīng)元之間傳遞電沖動，突起的大小和形態(tài)各不相同，很難用常規(guī)的顯微鏡鑒別。脊髓背根神經(jīng)節(jié)是周圍神經(jīng)的主要傳入神經(jīng)元，是感覺信號傳導(dǎo)的中繼站。背根神經(jīng)元細(xì)胞的獲取較為困難，需要在盡可能短的時間內(nèi)通過解剖顯微鏡獲得一定量的背根神經(jīng)節(jié)組織。神經(jīng)組織體外培養(yǎng)方法是當(dāng)代神經(jīng)科學(xué)一項很有價值的研究手段，背根神經(jīng)節(jié)富含周圍神經(jīng)系統(tǒng)感覺神經(jīng)元，已廣泛用于軸突的導(dǎo)向及再生、中樞及周圍神經(jīng)系統(tǒng)的髓鞘形成、神經(jīng)營養(yǎng)因子作用及受體分布、神經(jīng)細(xì)胞衰老機制、基因治療、組織工程等神經(jīng)科學(xué)的研究。

產(chǎn)品名稱：大鼠背根神經(jīng)元細(xì)胞

組織來源：脊髓組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣

傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠背根神經(jīng)元采用膠原酶-酶聯(lián)合消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠背根神經(jīng)元經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

豬肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA 試劑盒

Human Ureaplasma urealyticum aibody (UU-Ab) ELISA Kit 人解脲脲原體抗體(UU-Ab)試劑盒

PorcineEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit 豬內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforAlpha-bungarotoxin,Alpha-BGTELISAKitα-銀環(huán)蛇毒素

血液賴(lysine)含量化學(xué)比色法定量試劑盒20次

NudeMouseProteinPhosphatase,PPELISAKit裸鼠蛋酸酶(PP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)試劑盒 ，英文名： MIF ELISA Kit

Human amyloid precursor protein (APP) ELISA Kit 人淀粉樣前體蛋白(βAPP)試劑盒

MonkeyIerleukin1,IL-1ELISAKit白介素1(IL-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBGP(Osteocalcin/BoneGla-protein)ELISAKit兔

細(xì)菌氫/ATP酶(H+/K+-ATPase)活性比色法定量試劑盒20次

RabbitIerleukin9,IL-9ELISAKit兔子白介素9(IL-9)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人粘蛋白1(MUC1)試劑盒   96T/48T   ELISA   組裝/原裝

人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)試劑盒   96T/48T

人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)試劑盒   96T/48T

人早老素2(PS-2)試劑盒

NT5E重組大鼠 CD73 / NT5E 蛋白 Protein

DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5 0.5mgDR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 細(xì)胞調(diào)亡素/死亡受體5抗原

PRDX6重組人 Peroxiredoxin 6 / PRDX6 蛋白 Protein

IL17RC Protein Human 重組人 IL17RC 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

GHR Protein Mouse 重組小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白

293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA 人上皮細(xì)胞 M-NFS-60 (小鼠白血病細(xì)胞G-CSF依賴性)     CD3E Others Human 人 CD3E 人細(xì)胞裂解液   人星形膠質(zhì)細(xì)胞 Human  RSPO1 Protein Human 重組人 R-Spondin 1 / RSPO1 豬原代主動脈平滑肌細(xì)胞 人原代海綿體平滑肌細(xì)胞

大鼠背根神經(jīng)元原代細(xì)胞環(huán)腺苷二0酸核糖水解酶(cADPRH)重組蛋白 Recombinant Cyclic ADP Ribose Hydrolase (cADPRH)

CES2 Protein Human 重組人 CES2 / Carboxylesterase-2 蛋白

IFNA14重組小鼠 IFNA14 / Interferon alpha-14 蛋白 Protein

IL18R1 Protein Canine 重組狗 IL18R1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

DCUN1D1重組人 DCUN1D1 / SCCRO 蛋白 Protein