詳細(xì)介紹
大鼠成骨原代細(xì)胞
大鼠成骨細(xì)胞分離自顱骨組織;顱骨位于脊柱上方,由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成。除下頜骨及舌骨外,其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結(jié),起著保護(hù)和支持腦、感覺(jué)器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部,內(nèi)有顱腔,容納腦,共8塊。面顱為顱的前下部分,包含眶、鼻腔、口腔等結(jié)構(gòu),構(gòu)成面部的支架,共15塊。成骨細(xì)胞是骨形成的主要功能細(xì)胞,負(fù)責(zé)骨基質(zhì)的合成、分泌和礦化。骨不斷地進(jìn)行著重建,骨重建過(guò)程包括破骨細(xì)胞貼附在舊骨區(qū)域,分泌酸性物質(zhì)溶解礦物質(zhì),分泌蛋白酶消化骨基質(zhì),形成骨吸收陷窩;其后,成骨細(xì)胞移行至被吸收部位,分泌骨基質(zhì),骨基質(zhì)礦化而形成新骨;破骨與成骨過(guò)程的平衡是維持正常骨量的關(guān)鍵。成骨細(xì)胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機(jī)制、骨骼系統(tǒng)疾病的分子和細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ),也是藥物篩選、生物材料開發(fā)和生物工程研究的重要手段。
英文名稱 | Rat Osteoblast Cells | 組織來(lái)源 | 顱骨組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7316 |
細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:大鼠成骨細(xì)胞
組織來(lái)源:顱骨組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠成骨采用先用短時(shí)間消化、后用膠原酶反復(fù)消化制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠成骨經(jīng)ALP染色檢測(cè),純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
小鼠三腺原酸(T3)試劑盒
People in morphine peptide -2 (EM-2) ELISA Kit 人內(nèi)嗎非肽-2(EM-2)試劑盒
Humanβamyloidprecursorprotein,βAPPELISAKit 人淀粉樣前體蛋白(βAPP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
GuineaPigadvancedglycationendproducts,AGEs試劑盒豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性熒光定量試劑盒20次
Mousec-junELISAKit小鼠c-jun試劑盒規(guī)格:96T/48T
豚鼠膽囊收縮素/腸促肽(CCK)試劑盒 ,英文名: CCK ELISA Kit
Human dopamine D2 receptor (D2R) ELISA Kit 人多巴胺D2受體(D2R)試劑盒
Rabbitcholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit 兔子酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBeta-TG(RabbitBeta-Thromboglobulin)ELISAKit兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白
細(xì)菌銅ATP酶(Cu++-ATPase)活性比色法量試劑盒20次
rabbitInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISAKit兔子胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
人總鐵結(jié)合力(TIBC)試劑盒 96T/48T
人總前列腺特異抗原(tPSA)試劑盒 96T/48T
人總抗氧化能力(T-AOC)試劑盒 96T/48T
人總蛋白(TP)試劑盒 96T/48T
BMP2重組斑馬魚 BMP-2 / BMP2A 蛋白 Protein
TRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2 0.5mlTRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2) 壞死因子受體相關(guān)因子2抗原
ACVRL1重組人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ACTR3 Protein Human 重組人 ACTR3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
TFPI Protein Human 重組人 TFPI 蛋白 (His 標(biāo)簽)
A498細(xì)胞,人腎癌細(xì)胞系 蝙蝠肺細(xì)胞,Tb 1 Lu細(xì)胞 CL-0430RS1(大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞) Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞) HUM, 正常人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 小鼠成纖維細(xì)胞, 豬原代氣管上皮細(xì)胞 人原代腦血管周細(xì)胞
大鼠成骨原代細(xì)胞phospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185 0.2mlphospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185) peptide 0酸化氨基末端激酶1/2/3(pJNK1/2/3)抗原
CEP57 Protein Human 重組人 CEP57 / MVA2 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
NA重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) Protein
PF4 Protein Human 重組人 CXCL4 / PF4 蛋白
EGFR重組人 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 Protein
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。