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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠肺微血管內(nèi)皮采用組織貼塊法并結(jié)合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠肺微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠肺微血管內(nèi)皮原代細胞 | 組織來源 | 肺組織 |
英文名稱 | Rat Pulmonary Microvascular Endothelial Cells | 貨號 | YS-01X6996 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠肺微血管內(nèi)皮細胞分離自肺組織；肺是機體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經(jīng)肺系（指氣管、支氣管等）與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。微血管內(nèi)皮細胞密切參與包括再生、發(fā)育、傷口愈合等一系列生理及炎癥反應(yīng)。細胞呈梭形或多角形，形成單層后呈鵝卵石樣或鋪路石樣排列。肺微血管內(nèi)皮細胞構(gòu)成半選擇性屏障，該屏障對于肺氣體交換，調(diào)節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質(zhì)之間的流動具有重要意義。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
小鼠內(nèi)毒素(ET)ELISA 試劑盒
P Nixonn Ron (Prednisolone) ELISA Kit 人龍(Prednisolone)試劑盒
Human26Sproteasome,26SPSMELISAKit 人26S蛋白酶體(26SPSM)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanAbnormalprothrombin,APT試劑盒人異常原(APT)試劑盒規(guī)格：96T/48T
正常女性人體肝組織微粒體組分(5毫克/毫升)500微升
Mouseaidiuretichormone/vasopressin/argininevasopressin,ADH/VP/AVPELISAKit小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精加壓素(ADH/VP/AVP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
豬端粒酶(TE)ELISA 試劑盒
Human metallothionein (MT) ELISA Kit 人金屬硫蛋白(MT)試劑盒
PorcineBcl-2AssaciatedXprotein,BAXELISAKit 豬Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAlpha2-AP(MouseAlpha2-Aiplasmin)ELISAKit小鼠α2抗纖溶酶
血液(lithium)酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次
Nasoniaviipennisvitellogenin,VtgELISAKit蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原(vtg)試劑盒
粒細胞活化肽 (NAP) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
噬及細胞活化肽 -2(NAP-2) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
神經(jīng)激肽 A(Neurokinin A) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
中心粒細胞彈性蛋白酶 (Neuophil elastase) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
SELL重組小鼠 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
CK14/17/42/10 peptide 細胞角蛋白14抗原 0.5mgCK14/17/42/10 peptide 細胞角蛋白14抗原
BCL6重組人 BCL6 / B-cell CLL lymphoma 6 蛋白 (aa 1-150, His & Trx 標簽) Protein
ADK Protein Human 重組人 ADK 蛋白 (His & GST 標簽)
FCGR4 Protein Mouse 重組小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His 標簽)
ADAM15 Others Mouse 小鼠 ADAM15 / MDC15 人細胞裂解液 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0927 人脂肪細胞 CL-0347HCC38(人導(dǎo)管癌細胞) 中國倉鼠肺細胞;CHL CDH17 Others Human 豬原代垂體細胞 人原代Treg細胞
大鼠肺微血管內(nèi)皮原代細胞NGN3(neurogenin 3; Neurog3 0.5mgNGN3(neurogenin 3; Neurog3) 神經(jīng)元素3抗原
CDH2 Protein Human 重組人 N-Cadherin / CD325 / CDH2 蛋白 (His & Fc 標簽)
IL22RA1重組狗 IL22RA1 / IL22R 蛋白 Protein
FABP4 Protein Mouse 重組小鼠 FABP4 / ALBP / A-FABP / AFABP 蛋白
ADRBK1重組人 GRK2 / ADRBK1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
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