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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠肺血管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠肺血管平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 大鼠肺血管平滑肌原代細胞 | 組織來源 | 肺組織 |
英文名稱 | Rat Pulmonary Vascular Smooth Muscle Cells | 貨號 | YS-01X7002 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠肺血管平滑肌細胞分離自肺組織；肺是機體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經肺系（指氣管、支氣管等）與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。肺血管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。肺血管平滑肌細胞主要功能：①細胞表面表達介質（ICAM-1和VCAM-1）參與血管壁炎癥反應；②是多數(shù)重要動脈疾病的靶細胞。肺血管平滑肌細胞與主要病生理變化：①平滑肌增生易致肺動脈高壓；②先天性肺動脈狹窄；③肺動脈栓塞。血管平滑肌細胞的加速生長潛能是血管疾病進展的關鍵因素，最新研究表明血管平滑肌細胞表達的ICAM-1和VCAM-1能促進血管壁的炎癥反應，并且與血管疾病的發(fā)展及穩(wěn)定性有關。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產品：
小鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)ELISA 試劑盒
Neuroophic factor of rat glial cell line derived (GDNF) ELISA Kit 大鼠膠質細胞系來源的神經營養(yǎng)因子(GDNF)試劑盒
Humanneurofilameprotein,NFELISAKit 人神經絲蛋白(NF)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanactivatedproteinC,APC試劑盒人活化蛋白C(APC)試劑盒規(guī)格：96T/48T
脂質過氧化物反式十八碳四烯酸(cis-parinaricacid)ELISA定量測定試劑盒48/96次
MouseAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit小鼠血管緊張素轉化酶(ACE)試劑盒規(guī)格：96T/48T
豬β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA 試劑盒
Human ai alpha fodrin aibody IgG/IgA (-Fodrin IgG/IgA) ELISA Kit 人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)試劑盒
Porcineierleukin3,IL-3ELISAKit 豬白介素3(IL-3)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAhCGAb(Humanai-chorionicgonadoopin-aibody)ELISAKit人抗人絨毛膜抗體
血液牛病毒性腹瀉病毒II型(BovineViralDiarrhoeaVirus-2;BVDV-2)定量PCR擴增試劑盒20次
MouseTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit小鼠壞死因子α(TNF-α)試劑盒
小鼠25羥基D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISAKit ELISA.
小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISAKit ELISA.
小鼠C(VC)ELISAKit ELISA.
HAVCR1重組食蟹猴 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 Protein
MTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells 0.5mgMTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells)又稱：MYC 致癌基因(抗原)
SIRT1重組人 SIRT1 / SIR2L1 蛋白 (His 標簽) Protein
AHSP Protein Human 重組人 AHSP / ERAF 蛋白
SHH Protein Mouse 重組小鼠 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (His 標簽)
AGS細胞，胃腺癌細胞 人喉癌細胞,TU 686細胞 大鼠垂體瘤細胞;MMQ PRAP1 Others Human 人 PRAP1 / Proline-rich acidic 人細胞裂解液 EPC, 大鼠血管內皮祖細胞 非洲綠猴腎，BS-C-1細胞 hFOB 豬小腸上皮細胞永生化細胞 人原代肝竇內皮細胞
大鼠肺血管平滑肌原代細胞硫酸皮膚素差向異構酶(DSE)重組蛋白 Recombinant Dermatan Sulfate Epimerase (DSE)
ALDH7A1 Protein Human 重組人 ALDH7A1 / ATQ1 蛋白 (His 標簽)
CEACAM1重組人 CEACAM1 / CD66a 蛋白 (His 標簽) Protein
M1 Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) Matrix protein 1 / M1 蛋白 (His 標簽)
TPK1重組人 TPK1 蛋白 (His 標簽) Protein
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