大鼠肝非實質(zhì)原代細胞公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代膀胱移行上皮細胞 Calu-3(人肺腺癌細胞) T-47D 人導(dǎo)管癌細胞 1ml/T75 HEL（懸浮） 紅白細胞白血病細胞 NCI-H661 人大細胞肺癌細胞 小鼠原代視網(wǎng)膜Muller細胞

大鼠肝非實質(zhì)原代細胞

大鼠肝非實質(zhì)細胞分離自肝臟組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里最大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝實質(zhì)細胞具有肝功能的單位，是肝臟的基本組成單位之一。肝非實質(zhì)細胞是指除了肝實質(zhì)細胞之外的細胞，主要包含了肝竇內(nèi)皮細胞、肝星狀細胞、肝枯否細胞。

產(chǎn)品名稱：大鼠肝非實質(zhì)細胞

組織來源：肝

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：懸浮

細胞形態(tài)：圓形

傳代特性：不增殖；不傳代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠肝非實質(zhì)細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介

實驗室分離的大鼠肝非實質(zhì)采用取肝臟灌流、膠原酶消化、密度梯度離心法制備而來制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的大鼠肝非實質(zhì)經(jīng)過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

小鼠抗內(nèi)皮細胞抗體(AECA)ELISA 試劑盒

Rat ai thyroid peroxidase aibody (TPO-Ab) ELISA Kit 大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)試劑盒

Humancytoplasmicimmunoglobulin,CIgELISAKit 人胞漿免疫球蛋白(CIg)試劑盒 進口分裝

HumanAngiopoietin2,ANG-2試劑盒人血管生成素2(ANG-2)試劑盒

植物脯羥化酶(prolilhydroxylase)活性比色法定量試劑盒20次

Lensculinarisagglinin,LCAELISAKit扁豆凝集素(LCA)試劑盒

豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA 試劑盒

Human ai proteinase 3 aibody IgG (PR3 Ab-IgG) ELISA Kit 人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)試劑盒

Porcinehepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit 豬肝細胞生長因子(HGF)試劑盒 進口分裝

CLIAKitfora-Glu(MouseAlpha-Glucosidase)ELISAKit小鼠α葡萄糖苷酶

血液乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動力比色法定量試劑盒20次

Mouseansforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit小鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)試劑盒

植物D2(VD2)ELISAKit   ELISA. 

植物D3(VD3)ELISAKit   ELISA. 

植物D(VD)ELISAKit   ELISA. 

植物B6(VB6)ELISAKit   ELISA.

CNTN3重組大鼠 Contactin 3 / CNTN3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

FABP(brain 0.5mgFABP(brain) (Fatty acid-binding protein brain) 腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原

VSIG2重組人 VSIG2 / CTXL 蛋白 Protein

CGB7 Protein Human 重組人 CGB7 蛋白

DDR2 Protein Mouse 重組小鼠 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白

ARG1 Others Human 人 Arginase-1 / ARG1 人細胞裂解液   EFNB2 Others Canine 狗 Ephrin-B2 / EFNB2 人細胞裂解液   恒河猴腎細胞;RM-3  雪旺細胞SCM-prf  CL-0155ME-180( 永生化細胞 人原代肺微血管周細胞

大鼠肝非實質(zhì)原代細胞銅藍蛋白(CP)重組蛋白 Recombinant Ceruloplasmin (CP)

AGO1 Protein Human 重組人 AGO1 / Argonaute 1 / EIF2C1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

MERTK重組人 MERTK / Mer 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Egypt/2321-NAMRU3/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

RPN2重組人 RPN2 / Ribophorin II 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。