大鼠肝外膽管上皮原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代浦肯野細(xì)胞 CFPAC-1(人胰腺癌細(xì)胞) SK-OV-3 人腺癌細(xì)胞 1ml/T75 Hep G2 人肝癌細(xì)胞 NIH:OVCAR-3 人癌細(xì)胞 小鼠原代腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞

大鼠肝外膽管上皮原代細(xì)胞

大鼠肝外膽管上皮細(xì)胞分離自肝外膽管組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官，并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里最大的器官，位于機(jī)體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。臨床上常見的膽管病變?nèi)缒懙篱]鎖、先天性膽總管囊腫、原發(fā)性硬化性膽管炎等，都是以膽管上皮細(xì)胞為病變的靶位，引起膽管上皮的損傷。了解正常膽管上皮細(xì)胞的生物學(xué)特征和病變膽管上皮細(xì)胞的病理生理學(xué)特征對(duì)研究膽管病變的發(fā)病機(jī)制、診斷和治療具有重要意義。

產(chǎn)品名稱：大鼠肝外膽管上皮細(xì)胞

組織來源：膽管組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

方法簡(jiǎn)介

普諾賽實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肝外膽管上皮采用膠原酶灌注消化法后，再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化，接種至預(yù)先包被鼠尾膠原的培養(yǎng)瓶中，通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

普諾賽實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肝外膽管上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)ELISA 試劑盒

Rat ai smooth muscle aibody (ASMA) ELISA Kit 大鼠抗平滑肌抗體(ASMA)試劑盒

HumanCailageglycoprotein39,HCgp-39ELISAKit 人軟骨糖蛋白39(HCgp-39)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumanangiotensionⅡreceptor1Aibody,ATⅡR1Ab試劑盒人血管緊張素Ⅱ受體1抗體(ATⅡR1)試劑盒

植物谷氨酰半胱合成酶(glamylsysteinesyhetase)活性比色法定量試劑盒20次

Humanβ-glucuronidase，βGDELISAKit人β葡萄糖酸苷酶(βGD)試劑盒

豬α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒

Human ai albumin aibody (AAA) ELISA Kit 人抗白蛋白抗體(AAA)試劑盒

PorcineIerleukin6,IL-6ELISAKit 豬白介素6(IL-6)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAHA(Humanai-Histoneaibody)ELISAKit人抗組蛋白抗體

血液牛病毒性腹瀉病毒I型(BovineViralDiarrhoeaVirus-1;BVDV-1)定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次

MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-ⅠELISAKit小鼠壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)試劑盒

植物硝態(tài)氮測(cè)試盒   可見分光光度法   50管/48樣

土壤銨態(tài)氮測(cè)試盒   可見分光光度法   50管/48樣

土壤硝態(tài)氮測(cè)試盒   可見分光光度法   50管/48樣

植物態(tài)氮測(cè)試盒   可見分光光度法   50管/48樣

AIMP1重組小鼠 AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白 Protein

凋亡相關(guān)因子(FAS)重組蛋白 Recombinant Factor Related Apoptosis (FAS)

KCNIP3重組人 CSEN / Calsenilin / KCNIP3 蛋白 Protein

IL3 Protein Human 重組人 IL-3 / Interleukin-3 蛋白

LTBR Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 LTBR / TNFRSF3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

BABL/C2 BABL/C小鼠胚胎細(xì)胞  大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞;INS-1 神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞，SK-N-MC細(xì)胞 MPC細(xì)胞，小鼠垂體細(xì)胞  IL17A Others Human 人 IL17 / IL17A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液   SELL Others Human 羊原代主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 大鼠原代結(jié)腸成纖維細(xì)胞

大鼠肝外膽管上皮原代細(xì)胞Connexin-45(CX45 0.5mgConnexin-45(CX45) 間隙連接蛋白45(抗原)

ADSL Protein Human 重組人 ADSL / Adenylosuccinate Lyase 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CD4重組大鼠 CD4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

FCGR1 Protein Mouse 重組小鼠 CD64 / FCGR1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ULBP2重組人 ULBP2 / N2DL-2 蛋白  Protein