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詳細(xì)介紹
大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干原代細(xì)胞
大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞分離自股骨、脛骨；骨內(nèi)膜是一層致密結(jié)締組織膜，覆蓋在骨的表面(關(guān)節(jié)面除外)，新鮮骨內(nèi)膜呈粉紅色，含有豐富的血管、神經(jīng)和成骨細(xì)胞。此外，附著于骨的肌腱、韌帶于附著部位都與骨內(nèi)膜編織在一起。因而骨內(nèi)膜與骨質(zhì)結(jié)合甚為牢固。骨內(nèi)膜富含血管、神經(jīng)，通過骨質(zhì)的滋養(yǎng)孔分布于骨質(zhì)和骨髓。骨內(nèi)膜分內(nèi)、外兩層，外層主要是粗大的膠原纖維束，部分纖維穿入骨質(zhì)，使骨內(nèi)膜固定于骨面；內(nèi)層疏松，含成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞(分別具有產(chǎn)生新骨質(zhì)和改建骨的功能)。骨髓腔和骨松質(zhì)的網(wǎng)眼也襯著一層菲薄的結(jié)締組織膜，叫做骨膜。骨內(nèi)膜的內(nèi)層和骨膜有分化成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的能力，以形成新骨質(zhì)和破壞、改造已生成的骨質(zhì)，所以對骨的發(fā)生、生長、修復(fù)等具有重要意義。骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞是一種具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細(xì)胞，可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化，因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞。骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)條件要求較高，在培養(yǎng)過程中，受貼壁時間、種植密度、血清含量、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響。
英文名稱 | Rat Endosteal Mesenchymal Stem cells | 組織來源 | 股骨、脛骨 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7495 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞
組織來源：股骨、脛骨
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
方法簡介
普諾賽實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干采用沖洗骨髓、消化骨內(nèi)膜、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
普諾賽實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
小鼠降鈣素(CT)ELISA 試劑盒
Pigme epithelium derived factor (PEDF) ELISA Kit 人色素上皮衍生因子(PEDF)試劑盒
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Humanai-doublesandedDNA,dsDNA試劑盒人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物脊髓過氧化酶(MPO)活性高質(zhì)敏感(DTNB)比色法定量試劑盒20次
HumanXC-chemokinereceptor1,XCR1ELISAKit人XC趨化因子受體1(XCR1)試劑盒規(guī)格：96T/48T
豚鼠鈣調(diào)素(CAM)試劑盒 ，英文名： CAM ELISA Kit
Human dopamine (DA) ELISA Kit 人多巴胺(DA)試劑盒
Rabbitai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISAKit 兔子抗粒細(xì)胞顆?？贵w(ANGA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBFELISAKit大鼠B因子
細(xì)菌鐵型亞鹽還原酶活性比色法定量試劑盒20次
rabbitiercellularadhesionmolecule1,ICAM-1/CD54ELISAKit兔子細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)試劑盒規(guī)格：96T/48T
大鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISAKit ELISA.
大鼠C(VC)ELISAKit ELISA.
大鼠B6(VB6)ELISAKit ELISA.
WIF1重組小鼠 WIF1 / WIF-1 蛋白 Protein
催乳素(PRL)重組蛋白 Recombinant Prolactin (PRL)
BTK重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 Protein
IL2 Protein Human 重組人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白
NT5E Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD73 / NT5E 蛋白
BHK 敘利亞倉鼠腎細(xì)胞 大鼠肺泡巨噬細(xì)胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1] 肝癌細(xì)胞，QGY-7703細(xì)胞 ST2/o細(xì)胞，小鼠雜交瘤細(xì)胞 FGFR2 Others Human 人 FGFR2 / CD332 (aa 400-821) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 羊原代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 大鼠原代骨骼肌成纖維細(xì)胞
大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干原代細(xì)胞CD169/sialoadhesin(Sn 0.5mgCD169/sialoadhesin(Sn)(Sialic acid-binding Ig-like lectin 1;Siglec-1) CD169抗原
AGO3 Protein Human 重組人 AGO3 / Argonaute 3 / EIF2C3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
EPOR重組小鼠 EPOR 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
DLL1 Protein Rat 重組大鼠 DLL1 / Delta-like Protein 1 蛋白
IL17RC重組人 IL17RC 蛋白 (aa 1-454, His 標(biāo)簽) Protein
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