大鼠骨髓基質(zhì)原代細胞

大鼠骨髓基質(zhì)細胞分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質(zhì)細胞是一類具有多向分化潛能的干細胞，其中部分細胞有自我復制、高度增殖和多向分化能力，在特定培養(yǎng)條件下可向骨、軟骨、神經(jīng)膠質(zhì)細胞、心肌、骨胳肌、脂肪細胞、血管內(nèi)皮細胞等間葉組織細胞轉(zhuǎn)化。骨髓基質(zhì)細胞在自然條件下主要分化為成骨細胞，在不同的培養(yǎng)條件下其分化途徑不同，其在成骨細胞與成脂細胞分化之間呈反向變化。

產(chǎn)品名稱：大鼠骨髓基質(zhì)細胞

組織來源：骨髓

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠骨髓基質(zhì)采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠骨髓基質(zhì)經(jīng)CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

小鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA 試劑盒

People of ansfusion ansmitted virus / symplectic type hepatitis virus ((TTV) ELISA Kit 人輸血傳播病毒/辛型肝病毒((TTV)試劑盒

HumanplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit 人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-Ab試劑盒人抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物氧化型(GSSG)濃度比色法定量試劑盒50次

Humanansforminggrowthfactorsβ2，TGFβ2ELISAKit人轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠胃腸癌標志物CA199ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat bone morphogenetic protein receptor II (BMPR- II) ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)試劑盒

Humanornithinecarbamoylansferase,OCTELISAKit 人鳥氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenIerleukin3,IL-3試劑盒雞白介素3(IL-3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞IGF蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseGlucose-dependeinsulin-releasingpolypeptide,GIPELISAKit小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human TGF-β2 (ansforming Growth Factor β2) ELISA Kit

人血小板生成素(TPO)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human TPO (Thrombopoietin) ELISA Kit

人血小板反應蛋白1(TSP-1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human TSP-1 (Thrombospondin-1) ELISA Kit

人血小板反應蛋白2(TSP-2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human TSP-2 (Thrombospondin-2) ELISA Kit

BID重組小鼠 BID 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.5mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(18-39) 促腎上腺皮質(zhì)激素(18-39)(抗原)

CABP5重組人 CABP3 / CABP5 蛋白 Protein

IL2 Protein Human 重組人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

IL2RG Protein Rat 重組大鼠 IL2RG / CD132 蛋白

BRL大鼠Buffalo細胞，大鼠肝細胞 SH-SY5Y(神經(jīng)母細胞瘤細胞) 人肺粘液上皮樣癌細胞;NCI-H292  支氣管平滑肌細胞Many   HL-60, 人早幼粒白血病細胞 單核細胞-巨噬細胞,RAW264.7細胞 Hep G2(人肝癌細胞) 羊原代睪丸間質(zhì)細胞 人原代脂肪干細胞

大鼠骨髓基質(zhì)原代細胞FABP(brain 0.5mgFABP(brain) (Fatty acid-binding protein brain) 腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原

CGB7 Protein Human 重組人 CGB7 蛋白

CNTN3重組大鼠 Contactin 3 / CNTN3 蛋白 (Fc 標簽) Protein

DDR2 Protein Mouse 重組小鼠 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白

VSIG2重組人 VSIG2 / CTXL 蛋白 Protein

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。