大鼠骨原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代微血管周細(xì)胞 GNM(人口腔鱗癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞) HuH-7 人肝癌細(xì)胞 1ml/T75 KP-N-NS 人上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤（腦轉(zhuǎn)移） QG-56 人肺扁平上皮癌細(xì)胞 小鼠原代胚肺成纖維細(xì)胞

大鼠骨原代細(xì)胞

大鼠骨細(xì)胞分離自骨組織；骨組織的細(xì)胞成分包括骨原細(xì)胞、成骨細(xì)胞、骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞。只有骨細(xì)胞存在于骨組織內(nèi)，其他三種細(xì)胞均位于骨組織的邊緣。骨細(xì)胞（Osteocyte）是人體骨骼中最主要的細(xì)胞成分。在成年人骨骼中，骨細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)量的90%～95%，大約是成骨細(xì)胞數(shù)量的20倍。骨細(xì)胞生長在骨骼內(nèi)部的骨基質(zhì)中。骨細(xì)胞的細(xì)胞體呈梭形或類圓形，位于基質(zhì)構(gòu)成的骨陷窩內(nèi)。與神經(jīng)細(xì)胞類似，每個(gè)骨細(xì)胞具有大量向外延伸的突觸，而這些突觸均位于由骨基質(zhì)構(gòu)成的骨小管結(jié)構(gòu)中。通過這些突觸，骨細(xì)胞能夠與骨表面的細(xì)胞、周圍其它的骨細(xì)胞進(jìn)行“交流"。普遍認(rèn)為，骨細(xì)胞起源于成骨細(xì)胞。在骨形成的終末階段，成骨細(xì)胞將可能有3種不同的歸宿：分化成為骨細(xì)胞、轉(zhuǎn)移至骨表面成為暫不活動的成骨細(xì)胞、進(jìn)入程序死亡過程（凋亡）。骨細(xì)胞為扁橢圓形多突起的細(xì)胞，核亦扁圓、染色深。胞質(zhì)弱嗜堿性。電鏡下，胞質(zhì)內(nèi)有少量溶酶體、線粒體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，高爾基復(fù)合體亦不發(fā)達(dá)。骨細(xì)胞夾在相鄰兩層骨板間或分散排列于骨板內(nèi)。相鄰骨細(xì)胞的突起之間有縫隙連接。在骨基質(zhì)中，骨細(xì)胞胞體所占據(jù)的橢圓形小腔，稱為骨陷窩，其突起所在的空間稱骨小管。相鄰的骨陷窩借骨小管彼此通連。骨陷窩和骨小管內(nèi)均含有組織液，骨細(xì)胞從中獲得養(yǎng)分。

產(chǎn)品名稱：大鼠骨細(xì)胞

組織來源：骨組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 不增殖；不傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨采用膠原酶消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨經(jīng)骨鈣素免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA 試劑盒

Human vitamin B6 (VB6) ELISA Kit 人B6(VB6)試劑盒

HumanCollagenaseTypeIIELISAKit 人膠原酶II(CollagenaseII)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanc-fos試劑盒人c-fos試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉(zhuǎn)基因玉米MON863品系基因定量試劑盒20次

Humanserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit人絲/蘇蛋酸酶(STK)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)試劑盒 ，英文名： MMP-9 ELISA Kit

Human apoptosis signal regulating kinase I (ASK-1) ELISA Kit 人凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)試劑盒

MonkeyIerferonγ,IFN-γELISAKit 猴γ干擾素(IFN-γ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforbFGF-6(Humanbasicfibroblastgrowthfactor6)ELISAKit人堿性成纖維細(xì)胞生長因子6

細(xì)菌乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動力比色法定量試劑盒20次

RabbitIerleukin3,IL-3ELISAKit兔子白介素3(IL-3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人阻抑素(PHB)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human PHB (Prohibitin) ELISA Kit

人隱花色素1(CRY1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human CRY1 (Cryptochrome 1) ELISA Kit

人優(yōu)球蛋白(EL)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human EL (EuglobulinLysis) ELISA Kit

人信號素4D(SEMA4D)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human SEMA4D (Semaphorin 4D) ELISA Kit

IL8重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77, Fc 標(biāo)簽) Protein

Ⅹ(F10)重組蛋白 Recombinant Coagulation Factor X (F10)

EFNA4重組人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白  Protein

ALOX5AP Protein Human 重組人 ALOX5AP / FLAP 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)  人支氣管平滑肌細(xì)胞HBSMC  MRC-5(人胚肺成纖維細(xì)胞 )     HA Others H7N7 甲型流感 H7N7 (A/Netherlands/219/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 鴨原代胚胎成纖維細(xì)胞 狗原代皮下微血管內(nèi)皮細(xì)胞

大鼠骨原代細(xì)胞ECE1(Endothelin Converting Enzyme 1 0.5mgECE1(Endothelin Converting Enzyme 1) 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1抗原

ALPI Protein Human 重組人 Alkaline Phosphatase / ALPI 蛋白

CD226重組大鼠 CD226 / DNAM-1 蛋白  Protein

MSR1 Protein Mouse 重組小鼠 MSR1 / CD204 / SCARA1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CDC42BPB重組人 CDC42BPB 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein