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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠晶狀體上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠晶狀體上皮經(jīng)BFSP2（晶狀體蛋白）免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠晶狀體上皮原代細胞 | 組織來源 | 晶狀體組織 |
英文名稱 | Rat Lens Epithelial Cells | 貨號 | YS-01X7384 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠晶狀體上皮細胞分離自晶狀體組織；晶狀體源自胚胎發(fā)育外胚層，僅含有上皮細胞及其產(chǎn)物，晶狀體囊膜作為屏障將晶狀體與其它類型細胞分開；因而，晶狀體上皮細胞培養(yǎng)既無神經(jīng)和血管組織的干擾，又不受其它類型細胞如成纖維細胞的污染，保證了培養(yǎng)中細胞成分的單一性。晶狀體上皮細胞主要負責(zé)調(diào)節(jié)晶狀體的生理平衡，包括電解質(zhì)和液體的輸送。在正常的發(fā)育過程中，晶狀體上皮細胞分化和成熟，然后遷移到晶狀體內(nèi)部，產(chǎn)生晶體蛋白，自身也拉長而變成晶狀體纖維細胞，并最終失去細胞核和其它的細胞器。研究表明，晶狀體上皮細胞的分化和極化受到了眼部液體中的生長因子的調(diào)控，包括表皮生長因子和胰島素等。細胞貼壁后為扁平不規(guī)則多角形，呈單層生長、連成膜狀。晶狀體上皮細胞是緊密貼附于晶狀體前囊內(nèi)表面的單層上皮細胞，其異常增殖和分化與白內(nèi)障和后囊混濁的發(fā)生密切相關(guān)，體外培養(yǎng)是研究其生長規(guī)律的主要手段。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
豚鼠白介素18(IL-18)試劑盒 ，英文名： IL-18 ELISA Kit
Human ubiquitin ligase (E3/UBPL) ELISA Kit 人泛素連接酶(E3/UBPL)試劑盒
rabbitIerleukin8,IL-8ELISAKit 兔子白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBeta-CGELISAKit大鼠絨毛膜β
細菌乙醇脫氫酶總活性比色法定量試劑盒20次
RabbitFibrinogen,FbgELISAKit兔血纖蛋白原(Fbg)試劑盒規(guī)格：96T/48T
豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA 試劑盒
Human ai Ku aibody (ai-Ku-Ab) ELISA Kit 人抗Ku抗體(ai-Ku-Ab)試劑盒
PorcineCollageypeⅢ,ColⅢELISAKit 豬Ⅲ型膠原(ColⅢ)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAlb白蛋白(夾心法一步法)
血液型纖維蛋白溶酶原激活劑(uPA)活性比色法定量試劑盒20次
MouseVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKit小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)試劑盒
人可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISAKit ELISA.
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISAKit ELISA.
人D(VD)ELISAKit ELISA.
YWHAE重組小鼠 14-3-3 epsilon / YWHAE 蛋白 (GST 標簽) Protein
2,4-D/KLH(2,4-Dichlorophenoxyacetic acid 5mg2,4-D/KLH(2,4-Dichlorophenoxyacetic acid) 2，4-二氯苯氧乙酸偶聯(lián)血藍蛋白
NRG1重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD) Protein
IL3 Protein Human 重組人 IL-3 / Interleukin-3 蛋白
IL3 Protein Rat 重組大鼠 IL3 / interleukin 3 蛋白
CDH1 Others Mouse 小鼠 CDH1 / E-cad / CD324 人細胞裂解液 人海馬星形膠質(zhì)細胞(HA-h)(1×106) CM-R1鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞原代滑膜皮細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml 小鼠原代眼微血管內(nèi)皮細胞 人原代皮膚成纖維細胞
大鼠晶狀體上皮原代細胞MDM2 (urine double minute 2 0.5mgMDM2 (urine double minute 2) 雙微體2癌基因抗原
AK4 Protein Human 重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白
FGFR4重組食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 Protein
DDR1 Protein Mouse 重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (His & GST 標簽)
IL21R重組人 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白 (His 標簽) Protein
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